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感染科腹泻病原体筛查要点

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目录

01

临床指征与标本采集

02

筛查方法与技术路径

03

核心病原体检测策略

04

多重检测技术应用

05

结果判读与质控要点

06

检测流程优化方向

01

临床指征与标本采集

适用人群特征

包括长期使用免疫抑制剂、HIV感染者、肿瘤化疗患者等，此类人群易发生机会性肠道感染，需优先筛查罕见病原体。

免疫功能低下患者

因肠道屏障功能较弱或消化系统退化，对病原体抵抗力差，需重点关注轮状病毒、诺如病毒等常见致病原。

婴幼儿及老年群体

近期前往卫生条件较差地区或接触腹泻患者后发病者，需排查霍乱弧菌、志贺菌等高传染性病原体。

旅行史或接触史人群

01

02

03

关键临床症状识别

水样便伴脱水体征

大量水样腹泻伴随皮肤弹性下降、尿量减少，提示产毒性大肠杆菌或病毒性肠炎可能。

血便或黏液便

腹泻合并高热（38.5℃）及阵发性绞痛，可能为细菌性痢疾或耶尔森菌感染特征。

粪便中混有血液或脓性分泌物，需警惕侵袭性细菌感染如沙门菌、弯曲杆菌或阿米巴原虫。

持续性发热与腹痛

新鲜粪便标本

适用于无法自主排便的危重患者，需使用专用灭菌拭子深入直肠旋转取样并密封运输。

直肠拭子标本

血清学检测标本

针对特定病原体（如艰难梭菌毒素）需同步采集血清，分离血清前需避光保存于4℃环境。

采集后需在1小时内送检或立即置于转运培养基，避免病原体活性下降影响培养阳性率。

标本类型及时效要求

02

筛查方法与技术路径

常规镜检与培养

通过显微镜观察粪便样本中的白细胞、红细胞、寄生虫卵或原虫活动体，初步判断感染类型，尤其适用于阿米巴痢疾或贾第鞭毛虫感染。

粪便直接镜检

选择性培养基培养

厌氧环境培养

针对沙门菌、志贺菌、弯曲菌等细菌性病原体，采用SS琼脂、麦康凯琼脂等选择性培养基分离培养，结合生化反应鉴定菌种。

对难培养的厌氧菌（如艰难梭菌），需在厌氧罐或专用培养箱中完成，辅以毒素检测提高诊断准确性。

检测粪便中轮状病毒、诺如病毒等病毒抗原，或艰难梭菌毒素A/B，具有高灵敏度和批量检测优势。

免疫学检测技术

酶联免疫吸附试验（ELISA）

快速检测轮状病毒、腺病毒等常见病原体抗原，适用于门急诊即时筛查，但需注意假阴性风险。

胶体金免疫层析法

通过荧光标记抗体识别肠道致病性大肠杆菌（EPEC、EIEC）等病原体，需专业设备支持，结果判读依赖经验。

免疫荧光技术

分子诊断平台选择

多重PCR技术

同步检测10-20种腹泻病原体（如细菌、病毒、寄生虫），覆盖沙门菌、诺如病毒、隐孢子虫等，显著提升检出效率。

高通量测序（NGS）

对未知或罕见病原体（如肠道病毒新亚型）进行全基因组测序，适用于暴发疫情溯源或复杂病例研究。

实时荧光定量PCR

定量分析病原体核酸载量，适用于艰难梭菌毒素基因或产志贺毒素大肠杆菌（STEC）的精准检测。

03

核心病原体检测策略

细菌性病原体检测

通过粪便培养结合生化鉴定技术，明确沙门菌和志贺菌感染，需注意区分致病性与非致病性菌株，并针对耐药性进行药敏试验。

沙门菌与志贺菌检测

采用PCR或免疫学方法检测致泻性大肠埃希菌（如ETEC、EPEC、EHEC等），重点筛查产志贺毒素的O157:H7血清型，避免严重并发症。

大肠埃希菌分型检测

针对弯曲菌需微需氧培养，弧菌（如霍乱弧菌、副溶血弧菌）需选择性培养基分离，结合分子检测提高检出率。

弯曲菌与弧菌筛查

病毒性病原体检测

02

03

快速抗原检测技术应用

01

轮状病毒与诺如病毒检测

针对门诊患者优先选择高灵敏度的病毒抗原检测试剂盒，缩短报告周期并指导隔离措施。

腺病毒与星状病毒筛查

采用多重PCR技术同步检测肠道腺病毒（40/41型）及星状病毒，注意与其他病毒性腹泻的鉴别诊断。

通过胶体金免疫层析或RT-PCR快速检测轮状病毒抗原及诺如病毒RNA，尤其适用于婴幼儿及集体腹泻暴发调查。

寄生虫及特殊病原体

03

特殊病原体鉴别

针对旅行史或流行病学史患者，需扩展检测类圆线虫、等孢球虫等罕见寄生虫，并排除真菌性肠炎可能。

02

隐孢子虫与环孢子虫筛查

采用抗酸染色或免疫荧光法检测卵囊，对免疫缺陷患者需提高检测频率并联合分子生物学方法。

01

阿米巴原虫与蓝氏贾第鞭毛虫检测

粪便镜检结合ELISA检测抗原，必要时进行PCR确认，避免漏诊慢性或轻型感染者。

04

多重检测技术应用

多重PCR方案设计

需针对不同病原体的保守基因或特异性基因设计引物，如细菌的16SrRNA、病毒的衣壳蛋白基因等，确保检测的广谱性和特异性。

靶标基因选择

通过调整引物浓度、退火温度及循环次数，避免引物二聚体或非特异性扩增，提高多重PCR的灵敏度和准确性。

反应体系优化

在多重PCR体系中加入内参基因（如人类β-actin），用于监控样本质量和抑制物干