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2025年生物分离与纯化技术模拟试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（本大题共10小题，每小题2分，共20分。在每小题列出的四个选项中，只有一项是最符合题目要求的。请将正确选项字母填在题后的括号内。）

1.下列哪一项不属于生物分离与纯化技术的单元操作？

A.蒸发

B.过滤

C.吸附

D.膜分离

2.在色谱分离中，用于分离分子量大小不同物质的层析机制主要是：

A.溶剂化作用

B.沉淀作用

C.分子尺寸效应

D.离子交换作用

3.下列关于凝胶过滤层析（GPC）的描述，错误的是：

A.也称为大小排阻层析

B.柱效较低

C.分离基于分子大小

D.大分子先流出柱子

4.以下哪种色谱技术通常需要使用酸性或碱性溶剂作为洗脱剂，利用离子交换原理进行分离？

A.凝胶过滤层析

B.亲和层析

C.离子交换层析

D.凝胶渗透层析

5.亲和层析的核心是利用了生物分子间特定的：

A.疏水相互作用

B.电荷相互作用

C.分子尺寸差异

D.特异性结合

6.超临界流体（如超临界CO2）作为色谱介质或萃取溶剂，其主要优势之一是：

A.粘度极高

B.密度很大

C.沸点高易挥发

D.无毒无味且易于调节密度

7.在膜分离技术中，实现物质选择性分离的根本原因是：

A.膜的机械强度

B.膜的厚度

C.膜的孔径分布和化学性质

D.膜的柔韧性

8.下列哪种方法通常用于从发酵液中初步去除细胞和大的细胞碎片？

A.亲和层析

B.超滤

C.离子交换层析

D.凝胶过滤层析

9.影响色谱分离分辨率（Rs）的关键因素之一是：

A.柱长

B.洗脱剂浓度

C.固定相和流动相的选择

D.以上都是

10.在生物分离过程中，通常将目标产物纯化到所需水平后，需要进行浓缩和干燥（如冻干）。选择冻干技术的主要目的是：

A.提高产品稳定性

B.降低产品成本

C.加快干燥速度

D.去除更多水分

二、填空题（本大题共5小题，每空1分，共15分。请将答案填写在题中横线上。）

1.生物分离与纯化技术的目的是从复杂的混合物中______、______和______目标产物。

2.在亲和层析中，通常将______共价连接到层析介质上，用于结合目标蛋白质。

3.色谱法中，衡量柱效的指标是______，衡量分离程度的指标是______。

4.膜分离过程根据驱动力的不同，可分为______、______和______等主要类型。

5.影响膜分离性能的关键因素包括膜的种类、______、______和操作条件等。

三、名词解释（本大题共4小题，每题3分，共12分。请给出下列名词的defini??o和简要说明。）

1.分辨率(Resolution)

2.载量(Capacity)

3.等度洗脱(IsocraticElution)

4.截留分子量(MolecularWeightCut-off,MWCO)

四、简答题（本大题共3小题，每题5分，共15分。请简要回答下列问题。）

1.简述凝胶过滤层析（GPC）的基本原理及其主要应用。

2.与离子交换层析相比，亲和层析的主要优点是什么？

3.生物分离过程中，选择合适的层析填料需要考虑哪些主要因素？

五、计算题（本大题共1小题，共8分。请根据要求进行计算。）

某样品经离子交换层析分离，得到两条主要峰，峰A和峰B的保留体积分别为V_A=50mL，V_B=80mL。已知峰A和峰B的基线分离度R_s=1.5。假设样品上样量为10mg，测得峰A的峰高为10cm，峰B的峰高为6cm。请计算：

1.峰A和峰B的洗脱体积V_e分别是多少？（假设死体积V_m=30mL）

2.峰A和峰B的相对含量（按峰面积计算）分别是多少？（假设峰高与峰面积成正比）

六、论述题（本大题共1小题，共15分。请根据要求进行论述。）

以从含有目标蛋白X的粗提液中制备高纯度蛋白X为例，简要论述一个包含至少三种不同层析技术的分离纯化策略。请说明每一步选择的技术类型、基本原理、预期达到的分离目的以及可能需要关注的参数（如洗脱方式、洗脱剂选择等）。

试卷答案

一、选择题

1.C

2.C

3.D

4.C

5.