青霉素生产工艺文档讲课文档.pptVIP

青霉素生产工艺第1页，共26页。（A）、理化性质：1、溶解性：受pH影响游离酸：易溶于有机溶剂，难溶于水盐：易溶于水，几乎不溶于有机溶剂，当有机溶剂中含少量水时，溶解度增大。2、酸碱性：有机弱酸第2页，共26页。3、稳定性：干燥纯净的盐固体稳定；纯有机溶剂溶液稳定；遇酸碱易分解；в-内酰胺环易为亲核或亲电试剂作用而打开失活；青霉素的水溶液不稳定。

温度、pH对其稳定性的影响---------------------------------------------第3页，共26页。4降解反应第4页，共26页。5、聚合反应氨苄青霉素在水溶液中易形成聚合物，是氨苄青霉素过敏反应的主要过敏原之一。第5页，共26页。6、过敏反应可能为青霉噻唑多肽和青霉噻唑蛋白第6页，共26页。（B）、制备工艺1、菌种最早的原始菌种是点青霉菌(Penicilliumnotatum)；现用产黄青霉菌(Pen.chrysogenum)按菌丝的形态分为丝状菌（黄孢子和绿孢子）和球状菌（绿孢子和白孢子）两种。国内青霉素生产厂大都采用绿色丝状菌，有的厂家用白孢子球状菌。第7页，共26页。2、发酵工艺流程1）丝状菌发酵工艺流程大米茄子瓶第8页，共26页。2）球状菌培养工艺流程球状菌菌种亲米孢子生产米孢子种子液发酵液（亲米孢子培养）亲米锥形瓶25度，6-8d冷冻管（生产米孢子培养）大米茄子瓶25度，8-10d种子罐培养种子罐28度，50-60h，1.5v/(v*min)发酵罐培养发酵罐26度，PH6.7-7.0，6-7d，0.8-1.0v/(v*min)第9页，共26页。3、发酵工艺要点1）丝状菌：种子：砂土孢子接入斜面上，25℃培养6～7天，制成悬液，接入大米茄子瓶内，经25℃培养6～7天，制成大米孢子，真空干燥。生产时按接种量移入种子罐（葡萄糖、玉米浆、尿素），25℃培养40～45小时，菌丝浓度达40%以上，按10%-15%接种量移入繁殖罐（花生饼粉、葡萄糖）内。经25℃培养13～15小时，菌丝体积40%以上，残糖在1.0%左右，无菌检查合格便可作为种子，按30%接种量移入发酵罐。第10页，共26页。2）球状菌：首先由冷冻管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米浆的摇瓶培养原始亲米孢子，再接入大米茄子瓶生产大米孢子，两者都是在25度下静置培养10天可收获。保存在5度冰箱。种子培养：冷藏10天以内的生产米，接入种子罐（花生饼粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、饴糖）28度培养50-60h，当PH降为5.5-5.0，菌丝呈菊花团状，平均直径在100-130微米，每毫升球菌数6万-8万只，沉降率在85%以上，可用。接入发酵罐。第11页，共26页。培养基碳源：提供能量如乳糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉、天然油脂等。乳糖能被产生菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件，故为最佳碳源，但价格高，普遍使用有困难。天然油脂如玉米油、豆油也能被缓慢利用作为有效的碳源，但不可能大规模使用。目前生产上用的碳源是葡萄糖母液和工业用葡萄糖。丝状菌补糖一般在残糖降至0.6%左右、PH上升后开始加，0.07-0.15%/次，次/h;球状菌在PH高于6.5时开始加糖。第12页，共26页。氮源：提供蛋白合成原料玉米浆。现因国内玉米浆产量少，经调整配方以花生饼粉代替，生产水平也可达到技术指标。目前生产上用的氮源是花生饼粉、麸质粉玉米胚芽粉及尿素等。第13页，共26页。前体作为苄青霉素生物合成的前体有苯乙酸、苯乙酰胺等。它们一部分能直接结合到青霉素分子中。这些前体对青霉菌都有一定的毒性，加入量不能大于0.1%。加入硫代硫酸钠能减少它们的毒性。第14页，共26页。无机盐①硫和磷:硫浓度降低时青霉素产量减少3倍，磷浓度降低时青霉素产量减少1倍。②钙、镁和钾：青霉素的生物合成中合适的阳离子比例以钾30%、钙20%、镁41%为宜。如镁离子少，钾离子多时，菌丝细胞将培养基中氮源转化成各种氨基酸的能力强。钙离子影响细胞的生长和培养基的pH。③铁离子：铁易渗入菌丝内，它对青霉素发酵有毒