2026年三维设计一轮高中总复习生物学生用-第54讲　微生物的培养技术及应用.docxVIP

第54讲微生物的培养技术及应用

课程标准

1.阐明在发酵工程中防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的前提。

2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。

3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。

4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。

5.概述稀释涂布平板法和显微镜直接计数法是测定微生物数量的常用方法。

考点一微生物的基本培养技术

1.培养基的配制

（1）培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。

（2）种类及用途

（3）营养组成

①一般都含有、、和无机盐等营养物质。

②需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。

微生物

对培养基的需求

乳酸菌

添加

霉菌

将培养基调至性

细菌

将培养基调至性

厌氧微生物

提供的条件

提醒①牛肉膏、蛋白胨提供的主要营养物质有氮源、碳源、维生素等，牛肉膏还可以提供磷酸盐。

②可通过培养基中碳源、氮源类型判断培养对象类型。如培养基中无有机碳源，则培养物为自养生物；若培养基中无有机氮源，则培养物一般为固氮微生物。

2.无菌技术

（1）目的：获得纯净的微生物培养物。

（2）关键：防止。

（3）常用方法

【教材拾遗】（选择性必修3P10相关信息）生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中部分微生物的方法。

3.微生物的纯培养

（1）概念辨析

（2）酵母菌的纯培养操作步骤

提醒①平板倒置后，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

②倒平板整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。

（3）平板划线法操作步骤

提醒培养基中微生物数量过多或成片可能的原因

①菌液浓度过高。

②培养过程中被杂菌污染。

③利用接种环划线时，每次划线前未灼烧接种环灭菌。

1.（选择性必修3P9正文）微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落。（）

2.（选择性必修3P10正文）在培养霉菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性。（）

3.（选择性必修3P10正文）为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。（）

4.（选择性必修3P10正文）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和灭菌。（）

5.（选择性必修3P12～13探究·实践）倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。（）

6.（选择性必修3P12～13探究·实践）培养酵母菌时，可将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入适宜温度的恒温培养箱中培养24～48h。（）

1.（2025·河北高三联考）下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是（）

成分

蛋白胨

葡萄糖

K2HPO4

含量

10g

10g

2g

成分

伊红

亚甲基蓝

蒸馏水

含量

0.4g

0.065g

1000mL

A.从物理性质看该培养基属于固体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基

B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨

C.该培养基缺少提供无机盐的物质

D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用

2.（2025·辽宁沈阳高三期末）在做微生物实验时，为了防止杂菌污染，需要做好消毒和灭菌工作。下表中有关消毒和灭菌方法的使用，错误的是（）

选项

材料或器具

方法

A

水源

氯气消毒

B

培养皿

干热灭菌

C

牛奶

高压蒸汽灭菌

D

涂布器

灼烧灭菌

3.（2025·河北邢台高三月考）如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是（）

A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒处理

B.步骤①倒平板操作过程中，用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，防止周围环境中杂菌的污染

C.步骤③应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D.步骤③划线结束后在培养皿皿盖上做好标注，培养皿需要倒置培养

题后归纳

平板划线操作的注意事项

（1）灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。

（2）第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

（3）划线时最后一次划线不要与第一次划线相连。

（4）划线时力度大小要适当，避免用力过大将培养基划破。

（5）操作第一步即取菌种之前以及每次划线之前都需要将接种环进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧的目的不同：

4.（2025·安徽安庆高三联考）在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列相关叙述，错误的是（）

A.玻