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《生物分离与纯化技术》模拟试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每小题2分，共20分。请将正确选项的字母填在题后的括号内）

1.在生物分离过程中，用于去除液体中不溶性固体的单元操作是？

A.蒸馏

B.澄清

C.浓缩

D.层析

2.下列哪种分离方法主要利用混合物中各组分分子大小或水合半径的差异进行分离？

A.离心

B.电泳

C.凝胶过滤层析

D.离子交换层析

3.亲和层析的核心原理是利用了生物分子间的高度特异性结合，例如抗原与抗体、酶与其底物或抑制剂之间的结合。以下哪种物质最常被用作亲和层析的配基？

A.离子交换树脂

B.凝胶基质本身

C.特异性抗体或酶分子

D.大分子糖

4.在蛋白质层析过程中，若要利用蛋白质与层析介质上带电基团的相互作用进行分离，通常采用的方法是？

A.凝胶过滤层析

B.亲和层析

C.离子交换层析

D.凝胶渗透过滤

5.膜分离技术具有许多优点，以下哪一项通常不被认为是其优点？

A.分离效率高

B.可在低压下操作

C.通常能处理大规模物料

D.对热敏感物质分离效果较差

6.下列关于缓冲液的描述，哪一项是正确的？

A.缓冲液在所有pH条件下都能有效维持pH稳定

B.缓冲液的选择仅取决于目标分子的性质

C.生物分离过程中常需要使用特定pH的缓冲液来维持蛋白质的结构和活性

D.缓冲液浓度越高，缓冲能力越强，但蛋白质变性风险也越高

7.在一个蛋白质纯化方案中，首先通过离子交换层析得到粗提物，然后进一步通过凝胶过滤层析获得纯品。这种多步纯化策略的主要目的是？

A.增加总回收率

B.提高纯化倍数

C.除去杂蛋白，降低纯化过程中的干扰

D.简化后续的操作步骤

8.生物大分子（如蛋白质）在分离过程中通常需要维持一定的浓度。以下哪种方法不适合用于生物大分子的浓缩？

A.蒸发

B.透析

C.膜浓缩（如超滤）

D.离心

9.影响层析分离效果的关键因素之一是层析介质的颗粒度。通常情况下，层析介质颗粒度减小，会带来什么主要影响？

A.分离因数增大，分辨率提高

B.分离因数减小，分辨率降低

C.流动相流速增大，分离时间缩短

D.层析柱压力降增大，易造成介质压实

10.评价一个蛋白质纯化步骤或整个纯化方案的效果，最重要的指标是？

A.分离时间

B.操作简便性

C.目标产物的回收率

D.纯化设备的成本

二、名词解释（每小题3分，共15分）

1.澄清

2.截留分子量

3.洗脱

4.纯化倍数

5.分离因数

三、简答题（每小题5分，共25分）

1.简述膜分离技术的原理及其至少两种常见的应用。

2.与其他层析方法相比，凝胶过滤层析（凝胶渗透过滤）有何独特的分离原理和特点？

3.离心技术在生物分离中主要有哪些应用？

4.设计一个简化的蛋白质纯化策略，用于从含杂质的粗提液中初步分离纯化目标蛋白质，并说明选择该方法的原因。

5.影响生物大分子（如蛋白质）在层析过程中活性的主要因素有哪些？

四、论述题（10分）

结合具体实例，论述设计一个有效的蛋白质纯化策略时需要考虑哪些关键因素？如何根据目标蛋白质的性质选择合适的分离方法和步骤组合？

五、计算题（5分）

某蛋白质样品经层析分离后，测得目标蛋白在洗脱液中的体积分数为10%，收集的洗脱液总体积为500mL。如果目标蛋白的原始浓度是5mg/mL，样品初始体积是100mL，请计算该步纯化后的目标蛋白回收率（按质量计算）。

试卷答案

一、选择题

1.B

2.C

3.C

4.C

5.D

6.C

7.C

8.B

9.A

10.C

二、名词解释

1.澄清：利用重力沉降或离心作用，使液体混合物中的不溶性固体颗粒沉降至容器底部，从而获得澄清液体的单元操作。

2.截留分子量（MWCO）：指通过特定膜分离设备时，能够被完全截留（阻止通过）的分子的大小，通常以道尔顿（Da）或千道尔顿（kDa）表示。

3.洗脱：在层析过程中，将结合在层析介质上的目标组分或其他组分，用合适的溶剂（洗脱液）洗脱下来，使其进入流动相并随溶剂洗脱出来的操作。

4.纯化倍数：指经过某一纯化步骤或整个纯化过程后，目标产物的浓度（或质量）与初始浓度（或质量）的比值。

5.分