第二章色谱法导论.pptVIP

7.峰面积由色谱峰与基线之间所围成的面积称为峰面积，用“A”表示，是色谱定量分析的基本依据，对理想的对称峰，峰面积与峰高，半峰宽的关系为A=1.065h×W1/2。第29页，共78页，星期日，2025年，2月5日一组分的色谱流出曲线对色谱分析十分重要，从色谱图上可以获得以下信息：（l）根据色谱峰的个数，可以判断样品中所合组份的最少个数。（2）根据色谱峰的保留值(或位置），可以进行定性分析。(3)根据色谱峰下的面积或峰高，可以进行定量分析。（4）色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据。（5）色谱峰两峰间的距离，是评价固定相(和流动相)选择是否合适的依据。第30页，共78页，星期日，2025年，2月5日第三节色谱法基本原理色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离。组分要达到完全分离，两峰间的距离必须足够远，两峰间的距离是由组分在两相间的分配系数决定的，即与色谱过程的热力学性质有关。两组分分配系数相差越大，两色谱峰间的距离就越大。但是两峰间虽有一定距离，如果每个峰都很宽，以致彼此重叠，还是不能分开。这些峰的宽或窄是由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，即与色谱过程的动力学性质有关。因此，要从热力学和动力学两方面来研究色谱行为。色谱分析的基本理论有两个：一个是以热力学平衡为基础的塔板理论；另一个是以动力学为基础的速率理论，两个理论相辅相成，较为满意地揭示了色谱分析中的有关问题和现象。第31页，共78页，星期日，2025年，2月5日1、分配系数K和分配比k（1）分配系数K分配色谱的分离是基于样品组分在固定相和流动相之间反复多次地分配过程，而吸附色谱的分离是基于反复多次地吸附一脱附过程。这种分离过程经常用样品分子在两相间的分配来描述，而描述这种分配的参数称为分配系数K。它是指在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值，即分配系数是由组分和两相的热力学性质决定的。第32页，共78页，星期日，2025年，2月5日例：逆流分配色谱取一系列试管，向1号管加入互不相溶的两种溶剂，A溶剂为上相（动相），B溶剂为下相（静相），体积相等。加入物质Y（K=1）和物质Z（K=1/3）的混合物，各组分物质将按自己的分配系数在上下相中进行分配。平衡后，将上相转移到2号管内，其中含有相同体积的新下相，从1号转移来的样品将在2号管的上下相中再分配。与此同时，向1号管内加入新的上相，这里也将发生样品的再分配。·······第33页，共78页，星期日，2025年，2月5日第34页，共78页，星期日，2025年，2月5日第35页，共78页，星期日，2025年，2月5日分配系数小的物质Z沿一系列分溶管的“移动”速度比分配系数大的物质Y快。那么它流出色谱柱。每一种物质在一系列分溶管中是相当集中的，分溶曲线呈峰形，只要使用足够数目的分溶管，继续进行分配，就可以使两峰彼此分来。一定量的某一溶质在一定量的溶剂系统中分配时，转移次数越多，即分溶管数越多，其分溶曲线越集中，即峰形窄而高，有利于各物质的完全分离。第36页，共78页，星期日，2025年，2月5日（2）分配比k分配比又称容量因子，它是指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比。即k值越大，说明组分在固定相中的量越多，相当于柱的容量大，因此又称分配容量或容量因子。它是衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数。k值也决定于组分及固定相热力学性质。它不仅随柱温、柱压变化而变化，而且还与流动相及固定相的体积有关。第37页，共78页，星期日，2025年，2月5日滞留因子Rs分配比k值可直接从色谱图测得。设流动相在柱内的线速度为u，组分在柱内线速度为us，由于固定相对组分有保留作用，所以us＜u．此两速度之比称为滞留因子Rs。它反映了组分在流动相中的分配比例数。例如，某组分完全不被固定相滞留，即该组分100％分配在流动相中。第38页，共78页，星期日，2025年，2月5日(3)分配系数K与分配比k的关系其中β称为相比率，它是反映各种色谱柱型特点的又一个参数。例如，对填充柱，其β值一般为6～35；对毛细管柱，其β值为60～600。Cs，Cm分别为组分在固定相和流动相中的浓度；Vm为柱中流动相的体积，近似等于死体积；Vs为柱中固定相的体积。第39页，共78页，星期日，2025年，2月5日(4)分配系数K及分配比k与选择因子α的关系对A、B两组分的选择因子，用下式表示：上式表明：通过选择因子α把实验测量值k与热力学性质的分配系数K直接联系起来，α对固定相的选择具有实际意义。如果两组分的K