医学课件-没药甾酮对胆管癌 RBE 细胞移植瘤生长和 miRNA表达谱的影响.pptx

医学课件-没药甾酮对胆管癌RBE细胞移植瘤生长和miRNA表达谱的影响汇报人：XXX2025-X-X

目录1.研究背景

2.材料与方法

3.结果

4.miRNA表达谱分析

5.讨论

6.结论

7.参考文献

01研究背景

胆管癌概述胆管癌定义胆管癌是一种起源于肝外胆管上皮细胞的恶性肿瘤，包括肝门部胆管癌、肝内胆管癌和胆总管癌等。据世界卫生组织统计，胆管癌的年发病率约为3.5/10万，男性多于女性，发病年龄多在50岁以上。胆管癌病因胆管癌的病因尚不完全清楚，可能与慢性感染、胆石症、胆道寄生虫、遗传因素以及长期接触某些化学物质等因素有关。此外，乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染也与胆管癌的发生密切相关。胆管癌病理类型胆管癌的病理类型多样，主要包括腺癌、鳞状细胞癌、腺鳞癌和未分化癌等。其中，腺癌是最常见的类型，占胆管癌总数的70%以上。胆管癌的病理分期对于制定治疗方案和评估预后具有重要意义。

胆管癌治疗现状手术切除手术切除是胆管癌的首选治疗方法，适用于早期病例。手术方式包括胆管癌根治术、胆肠吻合术等。据统计，手术切除后的5年生存率约为20%-30%。化疗与放疗化疗和放疗是胆管癌的辅助治疗方法。化疗药物如5-氟尿嘧啶、吉西他滨等，放疗则用于控制局部肿瘤或减轻症状。但单独使用化疗或放疗的疗效有限，多与手术联合应用。靶向治疗与免疫治疗近年来，靶向治疗和免疫治疗在胆管癌治疗中逐渐崭露头角。靶向药物如索拉非尼等，针对肿瘤细胞信号传导通路进行干预。免疫治疗如PD-1/PD-L1抑制剂，通过激活患者自身免疫系统来杀伤肿瘤细胞。这些新型治疗手段有望提高胆管癌患者的生存率。

没药甾酮研究进展药理作用没药甾酮是一种具有多种生物活性的天然化合物，主要具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用。研究表明，没药甾酮能够抑制肿瘤细胞的增殖，诱导细胞凋亡，并抑制肿瘤血管生成。作用机制没药甾酮的作用机制复杂，涉及多个信号通路。研究发现，没药甾酮能够通过调节PI3K/AKT、MAPK等信号通路，抑制肿瘤细胞的生长和转移。临床应用目前，没药甾酮在临床上的应用尚处于探索阶段。初步临床试验表明，没药甾酮对多种癌症具有一定的治疗效果，如乳腺癌、肺癌、肝癌等。未来，有望在更多癌症的治疗中发挥重要作用。

02材料与方法

细胞培养与实验分组细胞来源实验采用人胆管癌细胞系RBE，来源于某肿瘤研究机构。细胞在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中培养，置于37℃、5%CO2的细胞培养箱中，每天更换新鲜培养基。细胞传代细胞传代时，用0.25%胰酶-EDTA消化细胞，待细胞完全从培养皿上脱落，加入新鲜培养基终止消化，用吸管吹打均匀后分瓶培养。实验中使用的细胞传代次数控制在10代以内，以保证细胞活力和实验结果的可靠性。实验分组实验分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组细胞数均为3×10^5个。对照组使用等体积的溶剂处理，低、中、高剂量组分别加入不同浓度的没药甾酮处理。每组设置3个复孔，以确保实验结果的重复性和可靠性。

没药甾酮处理方法药物配制没药甾酮用DMSO溶解，配制成不同浓度的储备液，储存于-20℃。实验前，根据预实验结果确定最佳处理浓度，稀释至所需浓度，确保DMSO终浓度不超过0.1%。处理时间细胞经没药甾酮处理24小时后，进行后续实验。处理时间的选择基于预实验结果，确保药物作用充分而不会导致细胞过度损伤。处理方法将没药甾酮溶液加入细胞培养皿中，轻轻摇匀使药物均匀分布。处理过程中保持细胞培养箱条件恒定，避免外界因素干扰实验结果。处理结束后，弃去药物溶液，用新鲜培养基洗涤细胞两次。

RBE细胞移植瘤模型建立细胞接种将RBE细胞悬液注射于裸鼠皮下，每只裸鼠接种1×10^6个细胞。注射部位选择背部或腹部，确保注射深度适宜，避免损伤内脏。模型观察接种后每周观察裸鼠的一般状况和肿瘤生长情况，记录肿瘤体积和重量。当肿瘤直径达到约1cm时，视为移植瘤模型建立成功。模型评估对建立的移植瘤模型进行病理学检查，确认肿瘤组织学特征与RBE细胞一致。同时，通过免疫组化等方法检测肿瘤组织中相关蛋白的表达情况，评估模型的质量和稳定性。

细胞增殖实验MTT法检测采用MTT法检测细胞增殖活性，通过检测细胞代谢产物甲臜的生成量来反映细胞增殖情况。实验设置对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组设3个复孔，检测细胞在处理后的吸光度值。集落形成实验通过集落形成实验评估细胞在软琼脂培养基中的克隆形成能力。将细胞接种于琼脂中，培养一定时间后，观察并计数形成的集落。集落数量反映细胞增殖和自我复制的能力。细胞周期分析利用流式细胞术分析细胞周期分布，检测细胞在G0/G1、S、G2/M期等不同周期的比例。通过细胞周期分析，了解没药甾酮对细胞周期的影响，进而探讨其对细胞增殖的调控机制。

03结果

没药甾酮对RBE细胞移植