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2025年仪器分析荧光试题和答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.关于荧光发射光谱的特征，下列描述正确的是（）

A.发射光谱的形状与激发波长无关

B.发射光谱的波长一定小于激发光谱

C.发射光谱的峰值强度与样品浓度呈严格线性关系

D.发射光谱的斯托克斯位移仅由分子振动弛豫引起

答案：A

解析：荧光发射光谱的形状主要取决于分子的电子能级结构，与激发波长无关（A正确）；由于斯托克斯位移，发射波长通常大于激发波长（B错误）；当浓度过高时会发生自猝灭，线性关系被破坏（C错误）；斯托克斯位移由振动弛豫、内转换等多种过程共同引起（D错误）。

2.下列分子中，荧光量子产率最高的是（）

A.苯（Φ≈0.1）

B.萘（Φ≈0.2）

C.蒽（Φ≈0.4）

D.菲（Φ≈0.3）

答案：C

解析：共轭体系越大、刚性平面结构越完整，荧光量子产率越高。蒽的共轭双键数多于萘和苯，且分子更平面化，因此量子产率最高（C正确）。

3.某荧光物质在25℃时荧光强度为I?，在5℃时荧光强度为I?，两者关系应为（）

A.I?＞I?

B.I?＞I?

C.I?=I?

D.无法确定

答案：B

解析：温度降低时，分子热运动减弱，非辐射跃迁概率降低，荧光量子产率增加，因此低温下荧光强度更强（B正确）。

4.以下不属于动态猝灭机制的是（）

A.激发态分子与猝灭剂碰撞失活

B.激发态分子与猝灭剂发生电子转移

C.激发态分子与猝灭剂形成非荧光络合物

D.激发态分子通过能量转移将能量传递给猝灭剂

答案：C

解析：动态猝灭（碰撞猝灭）依赖于激发态分子与猝灭剂的扩散碰撞，而静态猝灭是基态分子与猝灭剂形成稳定络合物（C属于静态猝灭，故正确）。

5.荧光分光光度计中，单色器的排列顺序通常为（）

A.激发单色器→样品池→发射单色器

B.样品池→激发单色器→发射单色器

C.发射单色器→样品池→激发单色器

D.激发单色器→发射单色器→样品池

答案：A

解析：激发单色器用于选择激发光波长，发射单色器用于选择发射光波长，顺序为激发单色器→样品池→发射单色器（A正确）。

6.采用荧光法测定某药物时，若溶液中存在大量Cl?，可能导致（）

A.荧光增强

B.荧光猝灭

C.激发波长红移

D.发射波长蓝移

答案：B

解析：卤素离子（如Cl?）是常见的荧光猝灭剂，可通过碰撞或电荷转移导致荧光减弱（B正确）。

7.某物质的荧光寿命为5ns，其激发态平均停留时间约为（）

A.5×10??s

B.5×10??s

C.5×10?12s

D.5×10?3s

答案：B

解析：荧光寿命的单位为纳秒（ns），1ns=10??s，因此5ns=5×10??s（B正确）。

8.荧光定量分析中，当吸光度A≤0.05时，荧光强度与浓度的关系可表示为（）

A.I_f=Kc

B.I_f=Kc2

C.I_f=K√c

D.I_f=K/c

答案：A

解析：当A≤0.05时，满足稀溶液条件，荧光强度I_f与浓度c呈线性关系，即I_f=Kc（A正确）。

9.以下哪种物质通常不用于荧光标记（）

A.异硫氰酸荧光素（FITC）

B.罗丹明B

C.四甲基罗丹明（TRITC）

D.碘化钾

答案：D

解析：碘化钾是荧光猝灭剂，而FITC、罗丹明B、TRITC均为常用荧光标记染料（D正确）。

10.某荧光物质的激发光谱最大波长为λ??=365nm，发射光谱最大波长为λ??=450nm，其斯托克斯位移为（）

A.85nm

B.170nm

C.450nm

D.365nm

答案：A

解析：斯托克斯位移=发射波长-激发波长=450nm-365nm=85nm（A正确）。

二、填空题（每空1分，共20分）

1.荧光产生的必要条件是分子具有______结构，且激发态通过______跃迁回到基态。

答案：共轭双键（或大π键）；辐射（或荧光）

2.荧光量子产率Φ_f的定义是______与______的比值。

答案：发射的荧光光子数；吸收的激发光子数

3.常见的荧光猝灭类型包括______猝灭和______猝灭，其中______猝灭会导致荧光寿命缩短。

答案：动态（碰撞）；静态（络合）；动态

4.荧光分光光度计中，光源常用______灯或______灯，检测器通常为______。

答案：氙弧；汞；光电倍增管（PMT）

5.维生素B?（