第二章 核酸的生物合成.pptVIP

第29页，共72页，星期日，2025年，2月5日③起始因子、引物酶、DNA聚合酶等随后结合，复制开始。第30页，共72页，星期日，2025年，2月5日第31页，共72页，星期日，2025年，2月5日引发体在复制叉上移动，沿模板链5’3’的方向移动，与复制叉移动的方向相同，识别合成的起始位点，DnaB蛋白活化引物合成酶。引发RNA引物的合成。领头链先引发开始合成，以原来一条DNA单链为模板（3’?5’),按5’?3’的方向合成一段RNA引物链。领头链开始合成后，随后链也开始合成其引物。引物长度约为几个至10个核苷酸，在引物的5’端含3个磷酸残基（引物酶的底物是核苷三磷酸），3’端为游离的羟基。（2）RNA引物的合成第32页，共72页，星期日，2025年，2月5日在DNA聚合酶Ш的催化下，以四种脱氧核糖核苷5’-三磷酸为底物，在RNA引物的3’端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。DNA链的延伸同时进行领头链和随后链的合成。两条链方向相反。领头链随后链冈崎片段半不连续复制冈崎模型（3）DNA链的延伸第33页，共72页，星期日，2025年，2月5日领头链—在DNA复制时，合成方向与复制叉移动的方向一致并连续合成的链。随后链—在DNA复制时，合成方向与复制叉移动的方向相反，形成许多不连续的片段，最后再连成一条完整的DNA链。半不连续复制—在DNA复制时，领头链是连续合成的,而随后链的合成是不连续的，这种复制方式称为半不连续复制。发现（1968）：同位素实验，3HdT?短时间内为DNA小片段?一段时间后?检测到DNA大片段。当用DNA连接酶的变异株时，检测到大量DNA片段的积累。——证明DNA复制中有小片段合成。第34页，共72页，星期日，2025年，2月5日冈崎片段在DNA复制过程中，领头链能连续合成，而随后链只能是断续的合成5??3?的多个短片段，这些不连续的小片段以其发现者的名字命名为冈崎片段。冈崎片段：真核生物中100-200个核苷酸（核小体的DNA单位）。原核生物中1000-2000个核苷酸（相当于一个顺反子）。第35页，共72页，星期日，2025年，2月5日蛋白Mr亚基数功能SSB756004结合单链DNADnaB蛋白(解螺旋酶)3000006DNA解螺旋,引物体成分引物酶(DnaG蛋白)600001RNA引物合成,引物体成分DNA聚合酶Ⅲ90000018~20新链延长DNA聚合酶I1030001除去引物,填充缺口DNA连接酶740001连接DNA旋转酶(DNA拓扑异构酶Ⅱ)4000004超螺旋参与链的延伸阶段的蛋白质和酶第36页，共72页，星期日，2025年，2月5日第37页，共72页，星期日，2025年，2月5日均以5/→3/方向形成前导链和滞后链第38页，共72页，星期日，2025年，2月5日第39页，共72页，星期日，2025年，2月5日第40页，共72页，星期日，2025年，2月5日当新形成的冈崎片段延长至一定长度，其3’-OH端遇到上一个冈崎片段时即停止合成。复制叉移动到终止区即停止复制（大肠杆菌有一个终止区）。这时会发生一系列变化：在DNA聚合酶Ⅰ催化下切除RNA引物；留下的空隙由DNA聚合酶Ⅰ催化合成一段DNA填补上；在DNA连接酶作用下，连接相邻的DNA链；修复掺入DNA链的错配碱基；以修复方式填补终止区50-100bp的空缺。这样以两条亲代DNA链为模板，各自形成一条新的DNA互补链。结果是形成了两个DNA双股螺旋分子。（4）切除RNA引物，填补缺口，连接相邻的DNA片段（复制终止）第41页，共72页，星期日，2025年，2月5日真核生物中DNA的复制特点1、真核生物染色体有多个复制起点，多复制眼，呈双向复制，多复制子。2、冈崎片段长约200bp.3、真核生物DNA复制速度比原核慢。4、真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长的原核中，起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时，往往采用更多的复制起点。5、真核生物有多种DNA聚合酶。6、真核生物线性染色体两端有端粒结构，防止染色体间的末端连接。由端粒酶负责新合成链5?RNA引物切除后的填补，亦保持端粒的一定长度。第42页，共72页，星期日，2025年，2月5日复制叉复制叉终止区端粒结构3?5?3?5?端粒结构端粒酶是含RNA的逆转录酶第43页，共72页，星期日，2025年，2月5日DNA复制的其它方式大肠杆菌双链环状DNA的复制（一个复制起点，双向复制）真核细