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柑橘果实糖、酸、VC含量的测定方法

熊庆娥

（四川农业大学）

Eleven手打

分测定程序及计算公式

建议先通读这些方法几遍，借好仪器，想好人员分配后，再到实验室

样品制备

样品果至少10个。擦净果皮后，用水果刀在每个果对称位置切取两块。去皮后，用纱布包裹好果肉，挤压果汁于干燥烧杯中，总量不低于100ml。样品液混合搅拌均匀后，可供测定可溶性固性物（TSS）、糖、酸、Vc。

总酸含量的测定

用移液管将5ml果汁转入100ml三角瓶，加酚酞1—2滴，用0.1NNaOH（以标定浓度为准）滴至溶液出现粉红色不消失至。记录滴定所消耗NaOH量。重复3次。

总酸含量（g/100ml）=V×N×0.064

V：NaOH滴定用量N：NaOH浓度（标定为准）

B：被滴定样品用量（5ml）0.064：柠檬酸折算系数

Eleven补充分析：

N表示mol/L。

②0.064的来历:折算系数即1ml氢氧化钠溶液摩尔浓度×0.064=1ml柠檬酸的质量。NaOH与柠檬酸的反应中，NaOH与柠檬酸的比例是1:3。柠檬酸的分子量为192.14

假设氢氧化钠浓度为Amol/L，即10-3Amol/ml。1ml氢氧化钠溶液与柠檬酸反应，则柠檬酸用量为

柠檬酸质量为13×10

三、Vc含量的测定

1．取果汁5ml，用1%草酸稀释，定容至50ml。即稀释10倍。用移液管吸取稀释液5ml至50ml三角瓶，通过半微量滴定管滴入2，6D至溶液呈粉红色且30秒不退色。记录所耗2，6D用量。重复三次。

2.Vc含量（mg/100ml）=V×A

V:2,6-D滴定用量A：每毫升2，6-D相当的Vc量（mg）

B：滴定所用样品量（5ml）C:样品稀释倍数（10）

Eleven分析补充：抗坏血酸在溶液中易氧化，在整个测定中，操作应迅速。滴定开始时，染料迅速加入，直至红色不立即消失，而后逐滴加入，并不断摇动锥形瓶直至终点，整个滴定时间不宜超过2.分钟。所有试剂配制，都需用重蒸馏。

糖含量的测定

还原糖的测定

用移液管吸取果汁10ml，转入100ml容量瓶，加水稀释定容到刻度，装入酸式滴定管。

用移液管分别吸取斐林液A、B各5ml于200ml三角瓶，摇匀后，加蒸馏水约30ml，置电炉上煮至沸腾。继续保持沸腾，并用样品液滴定至蓝色大部分减退，加次甲基蓝2滴，继续滴定至溶液刚好转砖红色止。记录样品滴定值（ml），重复三次。

转化糖的滴定

用移液管吸取果汁10ml，转入100ml容量瓶，加6NHCl5ml，置沸腾水浴上水解15分钟。溶液冷却后，用NaOH中和酸(先用6NNaOH5ml，后滴加0.5NNaOH)，以酚酞2滴指示。加NaOH至溶液显红色即是终点，此为转化糖测定液。将转化糖液装入酸式滴定管，用以滴定菲林液，方法同还原糖。

注:无色的还原型亚甲基蓝极易被空气中的氧所氧化，应调节电炉温度使瓶内溶液始终保持沸腾状态，液面覆盖水蒸气不与空气接触。整个滴定过程锥形瓶不能离开电炉随意摇动.

糖含量的计算公式

还原糖含量(g/100ml)=DV

转化糖含量(g/100ml)=DV

2，6-D称取52mgNaHCO3,溶于50ml蒸馏水，煮沸。再称取2，6-D50mg，加入沸腾的NaHCO

Vc（用于标定2，6-D）称取烘干Vc（抗坏血酸）20mg（精确至0.1mg），溶于1%的草酸，定容至100ml。用移液管吸取5ml转入50ml容量瓶，加草酸定容（稀释了10倍）。现配现用。

准确吸取Vc稀释液5ml转入100ml容量瓶，用2，6-D滴至粉红色，30秒不消退止。记录所耗2，6-D量（ml），重复三次。计算1ml2，6-D相当的Vc毫克数（A）。

A=W×

W：Vc重量（mg）V1：滴定

D：2，6-D滴定值V2

测定糖用试剂

斐林A硫酸铜（CuSO2·5H2

斐林B酒石酸钾钠173g、NaOH50g溶于蒸馏水，定容至500ml。

6NHCl取浓HCl250ml加入250ml蒸馏水中。

6NNaOH120gNaOH溶于500ml蒸馏水。

Eleven补充：第4项如果配的不是很准确也不用担心，准确最好不过。

1%亚甲基蓝0.5g亚甲基蓝溶于50ml蒸馏水。

葡萄糖（标定用）在分析天平上准确称取葡萄糖1g左右（精确至0.0001g），加水溶解定容于200ml容量瓶，即约5mg/ml葡萄糖。

斐林液的标定用上述葡萄糖液滴定10ml斐林液，滴定方法同还原糖测定