气相高效液相色谱分析.pptVIP

福建师范大学第1页，共30页，星期日，2025年，2月5日气相色谱法的特点（1）分离效率高：复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。（2）灵敏度高：可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量.（3）分析速度快：一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。（4）应用范围广：适用于沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。不足之处：不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。被分离组分的定性较为困难。第2页，共30页，星期日，2025年，2月5日气相色谱流程1-载气钢瓶；2-减压阀；3-净化干燥管；4-针形阀；5-流量计;6-压力表；4-针形阀；5-流量计;6-压力表；9-热导检测器；10-放大器；11-温度控制器；12-记录仪；1.载气系统：包括气源、净化干燥管和载气流速控制;2.进样系统：进样器及气化室；3.色谱柱：填充柱（填充固定相）或毛细管柱（内壁涂有固定液）；4.检测器：可连接各种检测器，以热导检测器或氢火焰检测器最为常见；5.记录系统：放大器、记录仪或数据处理仪；6.温度控制系统：柱室、气化室的温度控制。第3页，共30页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱是20世纪70年代初发展起来的一种新型分离分析技术。他是在经典液相色谱的基础上，引入气相色谱理论，在技术上采用高压输压泵、梯度洗脱技术、新型高效填充剂及各种高灵敏度监测器。高效液相色谱与气相色谱比较，可供选择的流动相种类较多，从有机溶剂到水溶剂，既能用纯溶剂又可用二元或多元混合溶剂，并可任意调配比例，通过改变溶剂极性或强度继而改变色谱柱效能、分离选择性和组分的容量因子，最后实现改善色谱系统分离度的目的。高效液相色谱第4页，共30页，星期日，2025年，2月5日1.分析速度快。2.分离效率高。3.灵敏度高、易于实现操作自动化。4.适用于高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。高效液相色谱法的特点第5页，共30页，星期日，2025年，2月5日流动相和固定相都是液体的色谱法即为液-液色谱，是利用样品组分在两种不相溶的液相间的分配来进行分离。一种液相为流动相，另一种是涂渍于载体上的固定相。b.液-液分配色谱流动相极性小于固定相极性的液-液色谱法称为正相分配色谱法流动相极性大于固定相极性的液-液色谱法称为反相分配色谱法a.液-固吸附色谱流动相为液体，固定相为固体吸附剂，根据物质吸附作用的不同来分离物质。第6页，共30页，星期日，2025年，2月5日第7页，共30页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱仪流程示意图第8页，共30页，星期日，2025年，2月5日高压泵工作原理（单向阀）六通阀工作原理（流路切换）进样装置流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，其结构如图所示：第9页，共30页，星期日，2025年，2月5日紫外光度检测器（UV）：最小检测量10-9g·mL-1，对流量和温度的波动不敏感，可用于梯度洗脱。最常用的检测器。第10页，共30页，星期日，2025年，2月5日定性方法：1.利用纯物质定性的方法利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。2.利用文献保留值定性第11页，共30页，星期日，2025年，2月5日常用的几种定量方法

（1）归一化法：若试样中含有n个组分，且各组分均能洗出色谱峰，则其中某个组分的质量可按下式计算特点及要求：归一化法简便、准确；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大；仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。第12页，共30页，星期日，2025年，2月5日（2）内标法：在一定试样中加入一定量的内标物，根据待测组分和内标物的峰面积及物质量计算待测物质质量的方法。内标物要满足以下要求：（1）试样中不含有该物质；（2）与被测组分性质比较接近；（3）不与试样发生化学反应；（4）出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。试样配制：准确称取一定量的试样W，加入一定量内标物mS计算式：第13页，共30页，星期日，2025年，2月5日内标法特点(1)内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响