精选高考生物人教一轮复习学案基因工程一PPT文档.pptVIP

高考生物人教一轮复习学案课件基因工程一PPT;1.基因工程是在水平上进行设计和施工的，因此又叫做，其原理是。

2.限制性核酸内切酶主要来源于；特点是；切割后形成末端和末端。

3.DNA连接酶的种类有和。

4.载体的作用是；必须具备的条件有能在宿主细胞内复制并稳定地保存，具有多个切点；具有某些；种类有、

和等。

5.目的基因的获取方法主要有、

、。;6.完整的基因表达载体包括、、、

。

7.转化是指目的基因进入内，并且在受体细胞内维持和的过程。

8.将目的基因导入植物细胞常用的方法有、

和；将目的基因导入动物细胞常用的方法是；将目的基因导入微生物细胞常用处理细胞。

9.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因的方法是；检测目的基因是否转录出mRNA的方法是；检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是。在个体水平上检测目的基因是否表达的方法是。;考点1基因工程的工具;;2.载体

（1）作用

①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。

②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。

（2）具备的条件

①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。

②有多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接。

③具有特殊的标记基因，以便进行筛选。

（3）种类

①常用载体——质粒

质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。

②其他载体

在基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。;说明：①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。

②限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因进行检测。;＊典例剖析＊;【知识链接】细菌在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，其限制性核酸内切酶可以识别和切割DNA上的特定碱基序列，降解外源DNA，而其自身或者不具有这种限制酶识别的序列，或者通过甲基酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。;＊对应训练＊;解析：本题考查基因工程，意在考查学生的理解能力。限制性核酸内切酶具有特异性，一种酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割，这种核苷酸序列是脱氧核苷酸序列，即切割的是DNA而不是RNA。可作为载体的有质粒、噬菌体、动植物病毒，其中质粒是最常用的载体。将目的基因与载体结合时，一般用同一种限制性核酸内切酶切割。将目的基因导入受体细胞，植物细胞作为受体细胞时，体细胞也可以；动物细胞作为受体细胞时，只能用其受精卵。;考点2基因工程的操作步骤;2.基因表达载体的构建

（1）基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。

（2）基因表达载体的构建方法（如图）;3.将目的基因导入受体细胞;4.目的基因的检测与鉴定

（1）分子水平检测

①导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含有目的基因的DNA片段作探针检测。

（2）个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。;＊典例剖析＊;【技巧点拨】（1）要使目的基因和载体能够连接，常使用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，使二者具有相同的黏性末端，这是基因工程中构建基因表达载体的重要环节。

（2）基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。

（3）基因工程操作过程中只有第三步（将目的基因导入受体细胞）没有发生碱基互补配对的现象。第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在黏性末端连接现象，第四步存在分子水平杂交方法。;＊对应训练＊;1