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再生医学肠道类器官技术员岗位考试试卷及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.肠道类器官培养常用的基质胶是（）

A.明胶B.纤连蛋白C.MatrigelD.胶原蛋白

2.以下哪种细胞不属于肠道干细胞来源（）

A.潘氏细胞B.杯状细胞C.成纤维细胞D.肠内分泌细胞

3.进行类器官培养时，细胞消化常用的酶是（）

A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.脂肪酶D.淀粉酶

4.培养肠道类器官的培养基中通常添加的生长因子是（）

A.EGFB.FGFC.PDGFD.TGF-β

5.类器官培养的最佳气体环境是（）

A.纯氧B.5%CO?，95%空气C.10%CO?，90%空气D.无CO?

6.肠道类器官传代时，合适的传代比例一般是（）

A.1:1B.1:2-1:3C.1:5-1:10D.1:20

7.用于鉴定肠道类器官中干细胞的常用标志物是（）

A.Lgr5B.Ki67C.CD45D.CK19

8.以下哪种方法可用于检测肠道类器官的活性（）

A.台盼蓝染色B.革兰氏染色C.免疫荧光染色D.银染色

9.肠道类器官冻存时，常用的冻存液成分不包括（）

A.DMSOB.FBSC.PBSD.甘油

10.从组织获取肠道类器官原代培养，首先要进行的操作是（）

A.组织清洗B.组织消化C.细胞接种D.加培养基

答案：1.C2.C3.A4.A5.B6.C7.A8.A9.D10.A

多项选择题（每题2分，共10题）

1.肠道类器官培养体系中包含的成分有（）

A.基础培养基B.生长因子C.抗生素D.血清

2.以下哪些属于肠道类器官的应用方向（）

A.疾病模型构建B.药物筛选C.细胞治疗D.组织工程

3.影响肠道类器官培养成功的因素有（）

A.组织来源B.培养条件C.操作技术D.实验人员性别

4.肠道类器官培养过程中可能遇到的问题有（）

A.类器官生长缓慢B.细菌污染C.细胞分化异常D.培养基干涸

5.用于肠道类器官鉴定的技术方法有（）

A.形态学观察B.免疫组化C.qPCRD.蛋白质印迹法

6.肠道干细胞的特性包括（）

A.自我更新能力B.多向分化潜能C.高增殖活性D.体积大

7.培养肠道类器官的器皿有（）

A.培养皿B.培养瓶C.96孔板D.离心管

8.在肠道类器官传代操作中，需要注意的有（）

A.消化时间B.接种密度C.培养基更换D.操作环境无菌

9.以下哪些生长因子对肠道类器官生长有促进作用（）

A.NogginB.R-spondin1C.Wnt3aD.TNF-α

10.肠道类器官与天然肠道组织相比，优势在于（）

A.可在体外大量扩增B.便于实验操作C.完全模拟体内环境D.可用于个性化研究

答案：1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABCD6.ABC7.ABC8.ABCD9.ABC10.ABD

判断题（每题2分，共10题）

1.肠道类器官可以无限传代培养。（）

2.无血清培养基不能用于肠道类器官培养。（）

3.肠道类器官只能从肠道组织获取。（）

4.免疫荧光可以用于定位肠道类器官中的特定细胞类型。（）

5.培养肠道类器官时，温度波动对其生长影响不大。（）

6.传代次数越多，肠道类器官的生物学特性越稳定。（）

7.台盼蓝染色阳性表示细胞有活性。（）

8.肠道类器官培养中添加抗生素可以完全避免污染。（）

9.基因编辑技术可用于构建特定基因敲除的肠道类器官。（）

10.不同来源的肠道组织培养出的类器官特性完全相同。（）

答案：1.×2.×3.×4.√5.×6.×7.×8.×9.√10.×

简答题（每题5分，共4题）

1.简述肠道类器官培养的基本流程。

答案：首先获取肠道组织，清洗后进行消化得到单细胞或细胞团，将其接种于基质胶中，加入含生长因子等的培养基，置于合适气体和温度环境培养。定期观察，待类器官生长到一定程度进行传代。

2.列举两种检测肠道类器官分化的方法及原理。

答案：免疫组化，利用抗体与抗原特异性结合，通过显色剂显示特定分化细胞标志物；qPCR，检测分化相关基因的表达量，根据基因表达水平判断分化情况。

3.肠道类器官培养过程中防止污染的措施有哪些？

答案：操作前对实验器材、试剂等严格灭菌，实验在超净台进行，保持无菌操作；定期更换培养基，添加适量抗生素；对培养环境定期清洁消毒；操作人员规范着装、消毒双手等。

4.简述肠道类器官在药物研发中的应用。

答案：可构建疾病类器官模型，用于筛选潜在药物，观察药物对类器官的作用效果，如细胞增殖、分化等变化；还能研究药物作用机制，为药物研发提供体外实验依据，缩短研发周期。

讨论题（每题5分，共4题）

1.如何提高肠道类器官培养的成功率和稳定性？

答案：选择合适的组织来源，优化培养条件，如精准调控培养基成分、气体环境和温度等；规范操作流程，包括组织处理、细胞接种等；建立质量控制体系，定期检测类器官特性，及时调整培养策