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FLAG-tag蛋白质的纯化及其鉴定
摘要
本文利用一条可被特异性识别的短肽(FLAG)作为蛋白质的标签与单纯蛋白质进行融合,通过亲
和层析法对融合蛋白质进行第一步纯化,得到的融合蛋白质用肠激酶切除FLAG短肽后再通过分子筛
层析对蛋白质进行第二步纯化,并分析各步纯化方法对蛋白质纯度的影响及其纯化后的质量检测。实
验结果表明,加有蛋白质标签FLAG短肽的融合蛋白质,在亲和层析后得到的蛋白质纯度较高,高效
液相色谱对其进行纯度检测可达91.8%,再通过第二步分子筛纯化后就可以得到更高纯度的目的分子
量的蛋白质,高效液相色谱对其进行纯度检测可达100%,最终得
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