人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)ELISA试剂盒说明书-赛拓森生物.pdfVIP

酶联免疫吸附测试EnzymeLinkedImmunosorbentAssay

人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)酶联免疫(ELISA)

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用，不得用于临床诊断规格：48T/96T

实验目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)

的含量。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)水平。用纯化的人

主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入

主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)，再与HRP标记的主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)抗体结合，

形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝

色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)

呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人主要组织相

容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ)浓度。

试剂盒组成：

试剂盒组成48孔配置96孔配置保存

说明书1份1份

封板膜2片2片

密封袋1个1个

酶标包被板1×481×962-8℃保存

标准品：1600ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存

标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存

酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存

注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：800、400、200、100、50ng/L.

样本处理及要求：

1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保

存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右

（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉

淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔

细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml

左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。