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酶联免疫吸附测试EnzymeLinkedImmunosorbentAssay
小鼠Ⅲ型胶原前肽(Pro-C3)酶联免疫(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用,不得用于临床诊断规格:48T/96T
实验目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中Ⅲ型胶原前肽(Pro-C3)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠Ⅲ型胶原前肽(Pro-C3)水平。用纯化的小鼠Ⅲ型胶原
前肽(Pro-C3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ⅲ型胶原前肽(Pro-C3),
再与HRP标记的Ⅲ型胶原前肽(Pro-C3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后
加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深
浅和样品中的Ⅲ型胶原前肽(Pro-C3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通
过标准曲线计算样品中小鼠Ⅲ型胶原前肽(Pro-C3)浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成48孔配置96孔配置保存
说明书1份1份
封板膜2片2片
密封袋1个1个
酶标包被板1×481×962-8℃保存
标准品:20μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存
标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存
酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存
注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:10、5、2.5、1.25、0.625μg/L.
样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保
存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右
(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉
淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔
细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml
左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后
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