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心肌干细胞治疗工艺开发工程师岗位考试试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下哪种细胞培养常用的培养基不适合心肌干细胞培养？

A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.LB培养基

2.细胞传代时，一般细胞汇合度达到多少进行传代较为合适？

A.30%-40%B.50%-60%C.70%-80%D.90%-100%

3.下列哪种设备常用于细胞冻存？

A.离心机B.超低温冰箱C.培养箱D.显微镜

4.心肌干细胞的鉴定不包括以下哪种方法？

A.形态学观察B.免疫荧光检测C.核酸测序D.流式细胞术

5.无菌操作时，常用的消毒酒精浓度是？

A.50%B.75%C.95%D.100%

6.以下哪种物质不是细胞培养中常用的血清替代物？

A.人血清白蛋白B.血小板裂解物C.胰蛋白酶D.无血清培养基添加剂

7.细胞培养过程中，二氧化碳培养箱的二氧化碳浓度一般设置为？

A.1%B.5%C.10%D.20%

8.进行细胞计数时，常用的染色剂是？

A.伊红B.台盼蓝C.结晶紫D.刚果红

9.以下哪种技术可用于扩增心肌干细胞？

A.RT-PCRB.基因编辑C.悬浮培养D.Westernblot

10.细胞复苏时，一般将冻存管在多少度的水浴中快速融化？

A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.心肌干细胞培养需要的基本条件有（）

A.合适的培养基B.适宜的温度C.一定的气体环境D.无菌条件

2.细胞冻存液的主要成分通常包括（）

A.血清B.DMSOC.抗生素D.缓冲液

3.鉴定心肌干细胞的标志物有（）

A.cTnTB.α-actininC.Nkx2.5D.Oct4

4.细胞培养过程中可能出现的污染类型有（）

A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染

5.以下属于细胞培养常用的耗材有（）

A.培养瓶B.移液器C.离心管D.细胞筛

6.影响心肌干细胞增殖的因素包括（）

A.生长因子B.细胞密度C.培养基成分D.培养时间

7.用于细胞计数的方法有（）

A.血细胞计数板计数B.流式细胞仪计数C.比浊法D.平板计数法

8.基因编辑技术可用于心肌干细胞研究的方面有（）

A.基因敲除B.基因过表达C.基因修复D.基因定位

9.细胞培养中常用的消化液有（）

A.胰蛋白酶B.胶原酶C.弹性蛋白酶D.胃蛋白酶

10.心肌干细胞治疗工艺开发需要考虑的因素有（）

A.细胞来源B.细胞质量控制C.治疗剂量D.给药途径

三、判断题（每题2分，共20分）

1.心肌干细胞可以在普通环境下培养。（）

2.细胞冻存时，冻存液中DMSO浓度越高越好。（）

3.免疫荧光检测可以用于确定心肌干细胞的分化状态。（）

4.细胞培养过程中，只要定期更换培养基就不会出现污染。（）

5.进行细胞传代时，细胞消化时间越长越好。（）

6.无血清培养基一定不含有任何动物来源成分。（）

7.流式细胞术只能用于细胞计数，不能用于细胞分选。（）

8.基因编辑技术可以随意改变心肌干细胞的基因序列。（）

9.细胞复苏后，可直接放入培养箱培养，无需进行其他处理。（）

10.心肌干细胞治疗工艺开发不需要考虑伦理问题。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述心肌干细胞培养的基本流程。

2.列举两种检测细胞活性的方法及原理。

3.简述细胞冻存和复苏的要点。

4.说明在心肌干细胞治疗工艺开发中质量控制的重要环节。

五、讨论题（每题5分，共20分）

1.讨论目前心肌干细胞治疗面临的主要挑战及可能的解决策略。

2.谈谈基因编辑技术在心肌干细胞治疗工艺开发中的应用前景与潜在风险。

3.如何确保心肌干细胞治疗的安全性和有效性，请阐述你的观点。

4.若要开发新的心肌干细胞培养工艺，你会从哪些方面入手？

答案

一、单项选择题

1.D2.C3.B4.C5.B

6.C7.B8.B9.C10.B

二、多项选择题

1.ABCD2.AB3.ABC4.ABCD5.ABCD

6.ABCD7.AB8.ABC9.ABC10.ABCD

三、判断题

1.×2.×3.√4.×5.×

6.×7.×8.×9.×10.×

四、简答题

1.取合适来源的心肌干细胞，用合适培养基在适宜温度、气体环境下培养，定期观察细胞状态，适时传代，细胞汇合度70%-80%时进行消化传代，必要时冻存。

2.台盼蓝染色法：活细胞细胞膜完整，拒染台盼蓝，死细胞细胞膜破损被染成蓝色，通过计数区分死活细胞比例。MTT法：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶可将MTT还原成不溶性蓝紫色结晶，根据吸光度检测细胞活性。

3.冻存要点：细胞生长良好时，用含血清和DMSO的冻存液，梯度降温冻存。复苏要点：37℃水浴快速融化冻存管，立即加入培养基稀释，离心弃上清后接种培养。

4.细胞来源明确且质量可靠，培养过程控制条件稳定，检测细胞活性、纯度、