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再生医学心肌干细胞提取研究员岗位考试试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.心肌干细胞主要存在于（）

A.骨髓B.心肌组织C.肝脏D.脾脏

2.以下哪种技术常用于分离心肌干细胞（）

A.荧光定量PCRB.流式细胞术C.WesternblotD.ELISA

3.心肌干细胞的表面标志物不包括（）

A.c-kitB.Sca-1C.CD34D.CD45

4.体外培养心肌干细胞常用的培养基是（）

A.DMEMB.RPMI1640C.F12D.McCoys5A

5.心肌干细胞提取过程中，常用的消化酶是（）

A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.纤维素酶

6.对心肌干细胞活性检测最常用的方法是（）

A.台盼蓝染色B.MTT法C.流式凋亡检测D.免疫组化

7.保存心肌干细胞的最佳温度是（）

A.4℃B.-20℃C.-80℃D.-196℃

8.提取心肌干细胞时，样本采集后一般需要在（）内处理。

A.1小时B.3小时C.6小时D.12小时

9.心肌干细胞具有（）能力。

A.无限增殖B.定向分化为心肌细胞C.分泌胰岛素D.吞噬细菌

10.以下哪种因素不利于心肌干细胞的提取（）

A.严格无菌操作B.样本长时间放置C.合适的消化条件D.正确的分离方法

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.心肌干细胞提取的来源有（）

A.成年心脏B.胚胎心脏C.脐血D.脂肪组织

2.用于心肌干细胞鉴定的方法有（）

A.免疫荧光B.免疫组化C.基因测序D.电镜观察

3.体外培养心肌干细胞需要添加的物质有（）

A.胎牛血清B.生长因子C.抗生素D.激素

4.影响心肌干细胞提取效率的因素包括（）

A.样本采集部位B.消化时间C.分离技术D.培养环境

5.心肌干细胞的生物学特性有（）

A.自我更新B.多向分化潜能C.免疫原性低D.可形成肿瘤

6.提取心肌干细胞过程中，防止污染的措施有（）

A.实验环境清洁B.器械严格消毒C.操作人员规范D.使用无菌试剂

7.心肌干细胞在再生医学中的应用方向有（）

A.心肌梗死治疗B.心肌病治疗C.心脏瓣膜修复D.改善心脏功能

8.以下属于干细胞的有（）

A.胚胎干细胞B.造血干细胞C.神经干细胞D.心肌干细胞

9.心肌干细胞提取实验中可能用到的仪器有（）

A.离心机B.显微镜C.细胞培养箱D.移液器

10.从心肌组织中提取干细胞的步骤包括（）

A.组织取材B.组织消化C.细胞分离D.细胞培养

三、判断题（每题2分，共20分）

1.心肌干细胞只能从心脏组织中提取。（）

2.所有心肌干细胞都具有相同的表面标志物。（）

3.消化时间过长对心肌干细胞的活性没有影响。（）

4.心肌干细胞可以在普通培养皿中培养。（）

5.提取心肌干细胞不需要考虑样本的年龄和性别。（）

6.免疫组化可以用于心肌干细胞的定量分析。（）

7.冷冻保存的心肌干细胞复苏后活性不受影响。（）

8.心肌干细胞在体外可以自发分化为多种细胞类型。（）

9.实验过程中戴手套就不需要对手进行消毒。（）

10.心肌干细胞提取技术已经非常成熟，不存在任何问题。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述心肌干细胞提取的基本流程。

答：首先获取合适的心肌组织样本，接着进行组织消化，使细胞分散，然后采用如流式细胞术等方法进行细胞分离，得到心肌干细胞，之后将其接种于合适培养基在细胞培养箱中培养。

2.列举三种检测心肌干细胞活性的方法及原理。

答：MTT法：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能将MTT还原为不溶性蓝紫色结晶甲瓒，其颜色深浅与活细胞数量和活性相关。台盼蓝染色：活细胞细胞膜完整，台盼蓝不能进入，死细胞可被染成蓝色，通过计数未染色细胞比例检测活性。CCK-8法：其试剂能被活细胞线粒体中的脱氢酶还原成具有高度水溶性的黄色甲瓒产物，颜色深浅反映细胞活性。

3.说明在心肌干细胞提取过程中防止细胞污染的要点。

答：实验环境要清洁，定期消毒；实验器械如移液器、离心管等要严格灭菌；操作人员要规范，实验前对手消毒，严格遵守无菌操作流程；使用的试剂要保证无菌，从开启到使用全程注意避免污染。

4.简述心肌干细胞在再生医学中的潜在优势。

答：心肌干细胞具有自我更新能力，可不断产生新细胞；有多向分化潜能，能分化为心肌细胞等修复受损心脏组织；免疫原性低，移植后引发免疫排斥反应可能性小，为心肌疾病治疗提供新途径，有望改善心脏功能。

五、讨论题（每题5分，共20分）

1.讨论目前心肌干细胞提取技术面临的挑战及可能的解决策略。

答：挑战包括提取效率低，不同来源样本差异大，且易受多种因素影响；细胞纯度难以保证，存在杂质细胞干扰后续研究和应用；活性维持难，在提取和培养过程中易失活。策略有优化提取方法，研究不同样本特性以提高效率；开发更精准的细胞分离技术提高纯度；探索合适培养条件，添加特殊因子维持细胞活性。

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