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常规病理切片制作规范与操作要点

常规病理切片是病理诊断的核心基础，其制作质量直接影响病理医师对病变的观察与判断。本文围绕切片制作全流程，详细阐述各环节操作规范及注意事项，为病理科技术人员提供标准化参考。

一、取材

取材是切片制作的初始环节，直接决定后续标本处理效果，需严格遵循规范流程。

（一）标本接收

操作流程：核对标本申请单与标本容器信息，包括患者姓名、性别、年龄、送检科室、标本部位、标本数量等。

检查标本状态，确认标本是否完整、有无破损、固定液是否足量，做好接收登记并签字确认。

注意事项：信息核对需双人复核，避免张冠李戴；发现标本与申请单不符、固定液不足或标本腐败时，立即与送检科室沟通并记录；接收后及时标注编号，避免混淆。

（二）取材

操作流程：根据标本类型选择合适工具，肿瘤标本需包括病灶区、边缘区及正常组织，常规取材块大小为1.5cm×1.5cm×0.3cm，厚度不超过0.5cm。

取材时保持组织完整，避免挤压、牵拉或刀痕损伤，对细小标本（如内镜活检组织）可先用滤纸包裹再取材。

注意事项：取材前工具需经高压灭菌处理；同一标本不同部位需分别编号，明确标注；疑难标本需与病理医师沟通，确保关键病变区域被取到；避免在组织块上留过多脂肪、筋膜或坏死组织。

（三）标本处理

操作流程：将取好的组织块放入脱水盒，清晰标注患者编号、组织部位等信息，确保编号与申请单一致。

对易碎、细小组织（如骨组织、淋巴结），需特殊固定或包裹保护，防止处理过程中丢失或破损。

注意事项：脱水盒需清洗干净、无残留组织；标注信息需清晰耐溶剂，避免后续处理中模糊；组织块放入脱水盒时避免重叠，保证处理液充分接触。

（四）环境安全与环境保护

操作流程：取材区需保持通风良好，操作人员穿戴工作服、手套、口罩、防护镜等个人防护用品。

医疗废物分类处理，组织废弃物、污染耗材放入黄色医疗废物袋，锐器放入专用锐器盒；固定液废液需收集至专用容器，经无害化处理后排放。

注意事项：避免直接接触甲醛、二甲苯等有毒试剂，若皮肤接触需立即用清水冲洗；取材结束后对台面、工具进行消毒处理；定期检测室内空气质量，确保符合安全标准。

二、组织处理

组织处理是将新鲜组织转化为可切片的石蜡组织块的关键步骤，需严格控制各环节参数。

（一）固定

操作流程：常用固定液为10%中性福尔马林，固定液用量为组织块体积的5-10倍，固定时间根据组织大小调整，一般为6-24小时。

对于特殊组织（如脂肪组织、神经组织），可适当延长固定时间；穿刺标本固定时间不超过12小时，避免组织过度收缩。

注意事项：固定需及时，标本离体后尽快放入固定液，防止组织自溶；固定液需定期更换，保证固定效果；避免使用变质、浑浊的固定液，中性福尔马林需调节pH值至7.2-7.4。

（二）水洗

操作流程：固定后的组织块用流水冲洗，去除残留固定液，冲洗时间为1-2小时，大块组织可延长至3小时。

水洗时将脱水盒完全浸没在流水中，确保水流通畅，避免组织块堆积。

注意事项：水洗不彻底会影响后续染色效果，导致切片着色不均；避免水洗时间过长，防止组织过度软化。

（三）脱水

操作流程：采用梯度酒精脱水法，依次经过70%酒精、80%酒精、95%酒精Ⅰ、95%酒精Ⅱ、100%酒精Ⅰ、100%酒精Ⅱ，每级脱水时间为30-60分钟，大块组织可延长至60-90分钟。

脱水过程需在脱水机中进行，确保酒精浓度准确，避免交叉污染。

注意事项：脱水需逐步进行，不可跳过低浓度酒精直接进入高浓度酒精，防止组织收缩过度；100%酒精需保持无水状态，定期更换，避免影响脱水效果；脱水时间不足会导致组织透明不佳，过长则会使组织变脆。

（四）透明

操作流程：脱水后的组织块放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中透明，每级时间为30-60分钟，组织块完全透明、无白色浑浊即可。

透明过程需在通风良好的环境中进行，避免二甲苯挥发污染。

注意事项：透明时间需严格控制，不足会导致浸蜡不充分，过长会使组织过度硬化、变脆；二甲苯需定期更换，保持透明效果；避免组织块在二甲苯中停留过久，防止组织溶解。

（五）浸蜡

操作流程：透明后的组织块放入融化的石蜡中浸蜡，石蜡温度控制在56-58℃，依次经过浸蜡Ⅰ、浸蜡Ⅱ、浸蜡Ⅲ，每级时间为60-90分钟。

所用石蜡需纯度高、无杂质，熔点为52-56℃，适合常规切片。

注意事项：浸蜡温度需稳定，避免过高导致组织碳化，过低则石蜡凝固无法充分浸润；浸蜡过程中需确保石蜡完全覆盖组织块，避免气泡产生；石蜡需定期过滤，去除杂质，防止影响切片质量。

（六）包埋

操作流程：将浸蜡后的组织块放入包埋盒，加入融化的石蜡，用镊子调整组织块位置，确保病变区域朝上、切面平整，待石蜡冷却凝固后形成石蜡组织块。

包埋时需快速操作，避免石蜡提前凝固导致组织块位置偏移。

注意事项：包埋盒需干净、干燥，标注清晰；组织块需摆