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近日,来自肯塔基大学的研究人员通过研究发现了一种名为
Arylquin1的新型分子,其可以作为正常细胞分泌Par-4的诱导子,
Par-4是一种抑制的蛋白质,在正常细胞未受时其可以有效
杀灭癌细胞,相关研究刊登于国际著名NatureChemicalBiology
上。
正常的细胞会分泌少量的Par-4分子,但是这种含量并不足以杀
灭癌细胞,而值得一提的是,如果Par-4的分泌被抑制就会促进
生长;文章中研究人员在利用培养基和动物模型进行研究揭示
了,低水平的Arylquin1分子在不损伤生产细胞(产生Par-4分子)
时,其会诱导Par-4分子的分泌。在文章中所描述的机制中发生反应
的过程中,其中用到了许多有关蛋白质纯化靶标确定的技术,
pull-down蛋白外融合实验,免疫共沉淀,WestenBlot等。许
多技术因为有前人的经验在本文中只是一带而过,故挑选本文有详尽
实验过程的pull-down技术来进行讲解。
蛋白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两
种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,通过免疫共沉淀
(Co-IP)、Pull-down技术或Far-western法研究。
Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或蛋白(生物
素-、His-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白(对
混合液中的所有蛋白一视同仁)或者结合小分子。通过Pull-down技
术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白或相关小分
子间的相互作用关系,从体外转录或翻译体系中检测出蛋白相互作用
Recently,researchersfromtheUniversityofKentucky
discoveredthroughresearchanewmoleculecalledArylquin1,
whichcanserveasaninducerfornormalcellstosecretePar-4.
Par-4isatumor-inhibitingproteinthatcaneffectivelykillcancer
cellswhennormalcellsarenotharmed.Relatedresearchwas
publishedintheinternationallyrenownedmagazineNature
ChemicalBiology.
NormalcellssecreteasmallamountofPar-4molecu,but
thiscontentisnotenoughtokillcancercells.Itisworth
mentioningthatifthesecretionofPar-4isinhibited,itwill
promotetumorgrowth.Inthearticle,researchersusedculture
mediaandanimalmodelstoconductstudiesinthelaboratory
andrevealedthatlowlevelsofArylquin1molecuwillinduce
thesecretionofPar-4molecuwithoutdamagingthe
productioncells(whichproducePar-4molecu).Intheprocess
ofreactioninthemechanismdescribedinthearticle,many
technologiesrelatedtoproteinpurificationandtarget
determination,p
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