小菜蛾田间种群靶标抗性基因频率的精准检测与SCBI类杀虫剂抗性遗传解析.docxVIP

小菜蛾田间种群靶标抗性基因频率的精准检测与SCBI类杀虫剂抗性遗传解析

一、引言

1.1小菜蛾的危害及分布

小菜蛾（Plutellaxylostella）隶属鳞翅目菜蛾科，是一种世界性的迁飞害虫，在全球各大洲均有分布。其分布范围涵盖亚洲、欧洲、非洲、北美洲、南美洲以及大洋洲等众多国家和地区。在我国，小菜蛾的踪迹遍布大江南北，从最北端的黑龙江到最南端的海南，从东部沿海地区到西部内陆地区，均能发现它们的身影，并且其发生代数呈现出由北向南逐渐增多的趋势。在黑龙江地区，小菜蛾每年发生3-4代，而在广东广州地区可达18-20代，海南地区则多达22代。

小菜蛾是寡食性害虫，主要以十字花科蔬菜为寄主，包括甘蓝、紫甘蓝、青花菜、菜心、芥菜、花椰菜、白菜、油菜、萝卜等常见蔬菜品种。小菜蛾对十字花科蔬菜的危害极为严重，初龄幼虫仅取食叶肉，留下表皮，在菜叶上形成众多透明小斑，俗称“开天窗”；3-4龄幼虫食量增大，能将菜叶咬食成孔洞与缺刻，严重时全叶几乎被食成网状。在蔬菜苗期，小菜蛾幼虫常聚集在中心叶为害，极大地影响蔬菜的包心；在留种株上，还会损害嫩茎、幼荚及籽粒，对蔬菜的产量和品质造成严重破坏。据相关研究统计，小菜蛾每年给全球蔬菜产业带来的经济损失高达40-50亿美元，严重制约了十字花科蔬菜的生产和发展。在一些地区，若防治不当，小菜蛾的危害甚至可导致蔬菜减产50%以上，部分严重受灾田块甚至绝收。

1.2小菜蛾抗药性研究现状

由于小菜蛾繁殖能力强、生活周期短，在适宜条件下，一年可发生多代，且世代重叠严重。在长期高强度的化学防治过程中，小菜蛾频繁接触各类杀虫剂，使得其抗药性问题日益突出。自20世纪50年代有机氯农药被广泛使用以来，小菜蛾就逐渐对其产生抗药性。随后，随着有机磷、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类等杀虫剂的大量应用，小菜蛾对这些药剂也相继产生不同程度的抗性。据相关研究报道，小菜蛾已对超过50种杀虫剂产生抗性，成为世界上抗药性最强的害虫之一。在东南亚地区，小菜蛾对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性倍数可高达数千倍，对有机磷和氨基甲酸酯类的抗性也十分普遍，导致这些传统杀虫剂在田间的防治效果大幅下降。

小菜蛾抗药性的产生，给农业生产带来了巨大的危害。为了达到防治效果，农民不得不增加农药的使用剂量和使用次数，这不仅增加了生产成本，还导致蔬菜中的农药残留超标，严重威胁到消费者的身体健康。高剂量、频繁地使用农药，还会对生态环境造成破坏，杀伤有益生物，如蜜蜂、捕食性昆虫和寄生性天敌等，进而破坏农田生态平衡，引发害虫再猖獗和次要害虫上升为主要害虫等问题。例如，过度使用农药导致小菜蛾的天敌数量减少，小菜蛾失去自然控制，种群数量迅速回升，危害加剧，形成恶性循环。

1.3研究目的和意义

本研究旨在检测小菜蛾田间种群靶标抗性基因频率，并探究SCBI类杀虫剂靶标抗性的遗传方式。通过对小菜蛾田间种群靶标抗性基因频率的检测，可以及时掌握小菜蛾对不同杀虫剂的抗性水平和变化趋势，为科学合理用药提供依据，避免盲目用药导致抗药性进一步发展。深入研究SCBI类杀虫剂靶标抗性的遗传方式，有助于揭示小菜蛾抗药性的形成机制，为开发新的防治策略和技术，寻找替代药剂提供理论基础，从而有效地控制小菜蛾的危害，保障农业生产的可持续发展、农产品质量安全以及生态环境的稳定。

本研究的结果对于解决小菜蛾抗药性问题具有重要的理论和实践意义。在理论方面，本研究将丰富小菜蛾抗药性的研究内容，为深入了解害虫抗药性的形成机制提供新的视角；在实践方面，本研究的结果将为小菜蛾的防治提供科学依据，指导农民合理使用农药，减少农药的使用量和使用次数，降低生产成本，减少农药残留，保护生态环境，促进农业的可持续发展。

二、小菜蛾田间种群靶标抗性基因频率检测方法

2.1传统检测方法概述

传统的小菜蛾靶标抗性基因频率检测方法中，生物测定法是较为经典的手段。生物测定法，也被称为抗性倍数法，其原理是通过比较室内饲养的敏感种群和田间抗性种群的致死中量（LD50）或剂量-反应曲线（LD-Pline）的斜率，以此来衡量抗性水平。该方法涵盖浸渍法、点滴法、表面接触法或药膜残留法和饲喂法这4种常见操作方式。例如在对浙江地区褐飞虱抗性水平的检测中，施德等人就采用了浸渍法，将褐飞虱样本浸渍在不同浓度的药剂溶液中，观察其死亡情况，从而计算出LD50，以此评估抗性水平。曹明章等学者在测定2001-2002年浙江等四省水稻二化螟4龄幼虫对阿维菌素、杀虫单、氟虫清和三唑磷的抗性水平时，则选用了点滴法，精确地将定量药剂点滴在试虫体表，记录试虫的死亡数据。

具体操作步骤上，若采用浸渍法，首先需准备不同浓度梯度的杀虫剂溶液，将新鲜的十字花科蔬菜叶片分别在各浓度溶液中浸渍一