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最新分子实验考试试题及答案

一、单项选择题

1.下列哪种方法常用于DNA的定量测定？

A.紫外分光光度法

B.比色法

C.荧光定量法

D.以上都是

答案：D

2.以下哪种酶用于DNA的连接反应？

A.Taq酶

B.DNA聚合酶

C.限制性内切酶

D.DNA连接酶

答案：D

3.凝胶电泳中，DNA向哪个电极移动？

A.正极

B.负极

C.不移动

D.随机移动

答案：A

4.PCR反应中，引物的作用是？

A.提供模板

B.提供合成的起始点

C.催化DNA合成

D.增加反应稳定性

答案：B

5.提取RNA时，为防止RNA酶的污染，通常会使用？

A.乙醇

B.氯仿

C.DEPC水

D.异丙醇

答案：C

6.用于蛋白质定量的方法中，最常用的是？

A.考马斯亮蓝法

B.双缩脲法

C.紫外分光光度法

D.茚三酮法

答案：A

7.下列哪种物质可用于沉淀DNA？

A.乙酸钠

B.氯化钠

C.氯化钙

D.氯化镁

答案：A

8.基因克隆中，常用的载体是？

A.噬菌体

B.细菌质粒

C.病毒

D.以上都是

答案：D

9.蛋白质电泳中，SDS的作用是？

A.使蛋白质带正电荷

B.使蛋白质带负电荷并具有相同的电荷密度

C.增加蛋白质的稳定性

D.促进蛋白质的聚合

答案：B

10.实时荧光定量PCR中，SYBRGreen的作用是？

A.标记引物

B.标记模板

C.与双链DNA结合发出荧光

D.与单链DNA结合发出荧光

答案：C

二、多项选择题

1.分子实验中常用的缓冲液有？

A.Tris-HCl缓冲液

B.PBS缓冲液

C.TAE缓冲液

D.TBE缓冲液

答案：ABCD

2.以下哪些是PCR反应的基本成分？

A.模板DNA

B.引物

C.dNTPs

D.DNA聚合酶

答案：ABCD

3.蛋白质提取过程中，常用的裂解液成分有？

A.去污剂

B.蛋白酶抑制剂

C.缓冲盐

D.金属离子螯合剂

答案：ABCD

4.基因测序的方法有？

A.Sanger测序法

B.二代测序技术

C.三代测序技术

D.四代测序技术

答案：ABC

5.分子杂交技术包括？

A.Southern杂交

B.Northern杂交

C.Western杂交

D.原位杂交

答案：ABCD

6.影响DNA酶切反应的因素有？

A.酶的用量

B.反应温度

C.反应时间

D.缓冲液成分

答案：ABCD

7.以下哪些操作可用于纯化DNA？

A.酚-氯仿抽提

B.乙醇沉淀

C.柱层析

D.凝胶回收

答案：ABCD

8.蛋白质纯化的方法有？

A.离子交换层析

B.凝胶过滤层析

C.亲和层析

D.疏水层析

答案：ABCD

9.细胞转染的方法有？

A.脂质体转染法

B.电穿孔法

C.病毒介导法

D.磷酸钙共沉淀法

答案：ABCD

10.荧光定量PCR的优点有？

A.灵敏度高

B.特异性强

C.可进行定量分析

D.操作简便快速

答案：ABCD

三、判断题

1.紫外分光光度法测定DNA浓度时，A260/A280比值应在1.8-2.0之间，说明DNA纯度较高。（）

答案：√

2.PCR反应中，退火温度越高，引物与模板的结合越稳定。（）

答案：×

3.提取RNA时，实验器具可以不进行特殊处理。（）

答案：×

4.蛋白质电泳中，聚丙烯酰胺凝胶的浓度越高，分离的蛋白质分子量范围越大。（）

答案：×

5.基因克隆中，载体和目的基因必须用相同的限制性内切酶切割。（）

答案：×

6.实时荧光定量PCR可以绝对定量和相对定量。（）

答案：√

7.分子杂交中，探针必须是DNA。（）

答案：×

8.酶切反应中，酶的用量越多，反应效果越好。（）

答案：×

9.蛋白质纯化过程中，所有的步骤都需要在低温下进行。（）

答案：√

10.细胞转染后，不需要进行筛选。（）

答案：×

四、简答题

1.简述PCR反应的基本原理和步骤。

PCR反应的基本原理是模拟体内DNA的复制过程，在体外通过高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤的多次循环，使特定的DNA片段得到大量扩增。基本步骤为：首先是变性，将反应体系加热至94-95℃，使双链DNA解旋为单链；然后是退火，降温至引物的退火温度（一般50-65℃），引物与单链模板结合；最后是延伸，升温至72℃，DNA聚合酶以dNTPs为原料，从引物的3端开始合成新的DNA链。

2.简述提取DNA的一般步骤。

一般步骤为：首先是样品处理，破碎细胞，使DNA释放出来，可采用机械研磨、酶解等方法；接着进行去蛋白，常用酚-氯仿抽提的方法去除蛋白质等杂质；然