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演讲人：日期:病理科肿瘤形态学检查标准

CATALOGUE目录01标本接收与处理02切片制备技术03显微镜检查规范04诊断分级标准05分子病理关联分析06报告质控与归档

01标本接收与处理

组织固定规范与时间控制010203固定液选择与浓度配比需采用中性缓冲福尔马林（10%浓度）作为标准固定液，确保组织细胞结构完整性与抗原保存效果，避免过度固定导致组织硬化或固定不足影响后续检测。固定体积与组织比例固定液体积应至少为组织体积的10倍，确保标本完全浸没，避免局部干燥或固定不均，尤其是空腔器官或囊性病变需切开后充分接触固定液。固定过程环境监控固定应在室温下进行，避免高温加速组织自溶或低温延缓固定速率，同时需密闭容器防止甲醛挥发影响固定效果及实验室安全。

标本编号与信息核对流程双人核对制度接收标本时需由两名工作人员同步核对申请单、标本容器标签及电子系统信息，确保患者姓名、病历号、标本部位等关键信息完全一致，并签字确认。唯一性标识管理采用条形码或二维码系统对标本进行编号，编号需包含科室代码、标本类型及流水号，防止重复或混淆，同时电子系统自动记录操作时间及责任人。异常情况处理流程对信息不全、标本泄漏或容器破损的病例，需立即联系临床科室补全信息或重新取样，并在系统中标注“待处理”状态，避免误入后续流程。

梯度脱水程序组织需依次经过70%、80%、95%及无水乙醇进行梯度脱水，每道程序时间根据组织类型调整（如致密组织延长脱水时间），确保彻底置换水分且避免组织收缩变形。脱水包埋标准化操作透明剂与浸蜡控制脱水后使用二甲苯作为透明剂置换酒精，后续浸蜡需在恒温蜡箱（58-60℃）中进行三次更换，每次浸蜡时间需匹配组织大小，确保石蜡充分渗透。包埋方向与标记包埋时需依据诊断需求确定组织切面方向（如肿瘤最大剖面），并在蜡块侧面标注编号，包埋模具需预热防止石蜡凝固过快产生气泡影响切片质量。

02切片制备技术

切片厚度与平整度要求标准厚度控制石蜡切片厚度应严格控制在3-5微米范围内，过厚会导致细胞重叠影响观察，过薄可能造成组织断裂或染色不均。边缘完整性切片边缘应完整无缺损，尤其是肿瘤组织与正常组织交界处需清晰可见，便于评估浸润范围和边界特征。平整度校准切片需保证整体平整无褶皱，避免因刀片角度或组织块固定不当导致局部厚度差异，影响后续染色和诊断准确性。

特殊染色技术应用标准网状纤维染色免疫组化辅助染色用于鉴别肿瘤组织来源，如区分癌与肉瘤，需确保染色后纤维网络清晰可见且背景无杂质干扰。黏液染色（如AB-PAS）针对分泌黏液的肿瘤（如胃肠道腺癌），染色需突出黏液成分的分布和强度，避免因染色时间过长导致假阳性。特殊染色需与免疫组化结果结合，如弹力纤维染色辅助判断血管侵犯时，需与CD34等血管标记物对照分析。

核质对比度组织切片需彻底脱蜡并充分复水，避免残留石蜡阻碍染料渗透，导致染色不均或局部模糊。脱蜡与复水控制分化与返蓝步骤苏木精染色后需盐酸酒精分化适度，返蓝液处理时间需精准，确保核染色深浅一致且无过度褪色现象。细胞核应呈清晰蓝色（苏木精染色充分），胞质为均匀粉红色（伊红染色适度），两者对比鲜明以区分不同细胞结构。苏木精-伊红染色质控点

03显微镜检查规范

肿瘤细胞核形态观察要点需评估核体积是否增大、核浆比例是否失调，以及是否存在显著的多形性（如不规则核轮廓、核裂或分叶状核）。核大小与多形性观察染色质是否呈粗颗粒状或均匀分布，异染色质聚集程度可提示细胞增殖活性及恶性程度。在特定视野下统计病理性核分裂象数量，为肿瘤分级提供量化依据。核染色质分布记录核仁数量、大小及清晰度，明显增多的嗜酸性核仁常与高度恶性肿瘤相关。核仁特分裂象计数

根据嗜酸性或嗜碱性染色差异判断细胞功能状态，如浆细胞样分化常表现为强嗜碱性胞质。胞质染色特性胞质特征与分化程度评估识别胞质内黏液空泡（如腺癌）、黑色素颗粒（如黑色素瘤）等特殊结构，辅助肿瘤分类。分泌颗粒与空泡鳞状细胞癌中可见角化珠或胞质内角蛋白沉积，需评估角化范围以确定分化等级。角化与鳞状分化平滑肌肉瘤等肿瘤胞质内可见肌丝束，需结合免疫组化验证肌动蛋白表达。肌源性标记物

间质反应及浸润模式分析促纤维间质反应成纤维细胞增生及胶原沉积程度可反映宿主对肿瘤的防御反应，硬化性间质多见于乳腺癌或胰腺癌。评估淋巴细胞、浆细胞等浸润密度及分布模式，肿瘤相关炎症可能与预后相关。确认血管内是否存在肿瘤细胞团，血管浸润是判断转移风险的关键指标之一。分析肿瘤边缘呈推挤性生长还是浸润性生长，后者常提示更高侵袭性。炎症细胞浸润血管/淋巴管浸润前沿浸润方式

04诊断分级标准

组织学分化程度评估如鳞癌需观察角化珠形成，腺癌需评估腺管结构完整性，神经内分泌肿瘤需检测嗜铬粒蛋白等特异性标志物表达。特定组织学结构特征分子病理学整合诊断对于形态学重叠的肿瘤类型（