植物组织培养基母液配制指南.pdfVIP

MS母液配制

一、配制母液的目的

在植物组织培养的过程中，配制培养基是日常必做的工作。通常先将各种药品配制成浓

缩一定倍数的母液(又称为浓缩贮备液)。母液根据化学性质分别配制。一般配成大量元素母

液(浓缩10倍)、微量元素母液(浓缩100倍)、铁盐母液(浓缩100倍)和有机物母液(浓缩

50～100倍)。配制母液不但节省配制时间，而且能够保证配制的准确性和配制时的快速移

取，极大提高了工作效率。此外，也便于培养基的低温保藏。

二、母液配制方法

（一）水和药品的准备

配制培养基用的水最好用纯水，一般用蒸馏水即可，但精细的试验须用重蒸馏水。化学

药品须用分析纯或化学纯，称量要准确，每称一种药品都必须准确记载，以便事后查对。

（二）器皿和用具的准备

种类：不同型号的烧杯、容量瓶、移液管、滴管、玻璃棒、三角瓶、试管、培养瓶、培

养基分装器等。

洗涤：三角瓶、试管、培养瓶先用清水清洗，然后用碱洗（即泡入热的洗衣粉水液中，

洗刷玻璃器皿的内外壁），再用清水反复冲洗干净，直至冲水后瓶壁不挂水珠，最后用蒸馏

水淋一遍，晾干或烘干备用。

移液管、容量瓶等由于口小，不便碱洗，需用酸洗，较脏的其它玻璃器皿液要用酸洗，

酸洗可用40g工业用重铬酸钾经少量水溶化，然后缓缓加入粗制浓硫酸至1000ml，制成铬

酸—硫酸混合液，来清洗。酸洗的洗法是把器皿放入酸液中1天，然后放在流水中冲洗干净，

再用蒸馏水洗一遍，放入烘箱中烘干备用。

（三）母液的配制和保存

经常使用的培养基，可先将各种药品配成浓缩一定倍数的母液，放入冰箱内保存，用时

再按比例稀释。母液要根据药剂的化学性质分别配制。一般配成大量元素、微量元素、铁盐、

维生素、氨基酸等母液，其中维生素、氨基酸类可以分别配制，也可以混在一起。

大量元素原则上可以混在一起，但硫酸镁（MgSO2HO）和氯化钙（CaCl2HO）要分别4222

2+2+2+3-

单独配制，因为高浓度的Ca和Mg与磷酸盐混合，会产生不溶性沉淀。Ca和PO一起混合4

易发生沉淀。但定容后，沉淀即会消失。

铁盐也容易发生沉淀，需要单独配制。一般硫酸亚铁（FeSO7HO）和乙二胺四乙酸二42

钠(Na-EDTA)配成100倍浓度的铁盐螯合剂比较稳定，不易沉淀。

2

微量元素可配成50或100倍浓度的混合母液。KI可以单独配成母液。

氨基酸可以和维生素一起配成100或200倍液，也可将它们中的几种有机成分分别配制，

以便配制不同培养基时使用方便。一般配制浓度为甘氨酸1～2mg/ml，维生素B10.5～1

mg/ml，维生素B0.5～1mg/ml，烟酸0.5～1mg/ml，肌醇20mg/l。6

植物生长调节物质也可以分别配制成溶液，储存于冰箱。一般浓度为0.5～1mg/ml。

IAA、NAA、IBA、2,4-D之类生长素，可先用少量0.1N氢氧化钠或乙醇溶解，然后再定容到

所需要的体积。KT、BA等细胞分裂素则可用少量0.1N盐酸加热溶解，然后加水定容。

以上各种混合液(母液)或单独配制药品，均应分别贴上标签，注明母液号、配制日期、

倍数及配1L培养基应取的量。母液最好放入2—4℃冰箱中保存，以免变质、沉淀、长霉。

母液贮存时间不宜过长，最好在1个月内用完。如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

至于蔗糖、琼脂等，可按配方中要求，随称随用。下面以Ms培养基为例，说明母液的配制

方法及其各种物质的量，配lL培养基吸取量。附MS母液成分表见表1。

表1MS基本培养基所需母液的配制

规定称取称取量/配成的母液配制1L培养基应移

母液名称化合物名称扩大倍数

量/mg