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第1页,共13页,星期日,2025年,2月5日第一节吸光光度法基本原理吸光光度法简介概念:单色光、复合光、互补色光物质颜色的形成物质的颜色是由其主要吸收色光的互补色光决定的。物质对光的选择性吸收。光吸收曲线光吸收定律(朗伯—比耳定律)第2页,共13页,星期日,2025年,2月5日吸光光度法简介:许多物质的溶液呈现出各种不同的颜色,一般来说,有色物质含量越高,其溶液的颜色就越深。因此,通过比较有色溶液颜色的深浅,即可测定有色物质的含量。有色物质溶液之所以呈现出各种不同的颜色,是因为有色物质选择性地吸收了不同波长的光。吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法。第3页,共13页,星期日,2025年,2月5日
概念:光是一种电磁波,根据波长或频率排列。波长范围<10-1nm10-1~10nm10~400nm400~750nm0.75~1000μm0.1~100cm1~1000cm光谱区域γ射线X射线紫外光可见光红外光微波无线电单色光:复合光:互补色光:具有同一波长的光称为单色光。由不同波长组成的光称为复合光。按一定比例混合可得到白光的两种单色光互称为互补色光。第4页,共13页,星期日,2025年,2月5日白光红黄绿橙蓝青紫青蓝光的互补示意图:第5页,共13页,星期日,2025年,2月5日物质颜色的形成:物质的颜色是由其KMnO4白光红黄橙蓝青紫青蓝绿主要吸收色光的互补色光决定的。ΔE=Ej-EiΔE=hc/λ第6页,共13页,星期日,2025年,2月5日光吸收曲线:确定最大吸收波长λmax。吸光光度法定性分析的依据。吸光光度法定量分析的依据λA不同浓度KMnO4溶液的光吸收曲线第7页,共13页,星期日,2025年,2月5日朗伯—比耳定律:II0t式中:I0是入射光强度,It是透入射光强度。b是液层厚度,c是溶质物质的量浓度。a是与物质本性及入射光波长有关的常数。(透光率)T=It/I0×100%则lg1/T=abc(吸光度)A=lgI0/It则A=abclgI0/It=abc第8页,共13页,星期日,2025年,2月5日第二节吸光光度分析的基本定律光吸收定律—朗伯-比耳定律(TheLambert-Beer’sLaw)当一束平行的、强度为I0的单色光垂直照射于厚度为b、浓度为c的单位截面积的均匀液层时,由于溶液中吸光质点对入射光部分吸收,使透过光强度降至It。如果将液层分成厚度为无限小的相等薄层,每一薄层厚度为db,又设薄层内含有dn个吸光质点,照射到薄层上的光强度为I,光通过薄层后,强度变化量为dI,则dI与I成正比,也与dn成正比,即:第9页,共13页,星期日,2025年,2月5日第三节吸光光度分析方法及仪器
一、目视比色法二、光电比色法三、分光光度法应用分光光度计测量溶液的吸光度,以确定物质含量的分析方法称为分光光度法。1.标准曲线法图标准曲线配制一系列浓度不同的标准溶液,显色后,用相同规格的比色皿,在相同条件下测定各标液的吸光度,以标液浓度为横坐标,吸光度为纵坐标作图,理论上应该得到一条过
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