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第二节、重组DNA导入大肠杆菌;一、重组质粒DNA分子转化大肠杆菌;Ca2+诱导的大肠杆菌转化法
电穿孔转化法
三亲本杂交接合转化法;用CaCl2处理大肠杆菌，细菌表面正电荷增加，细胞壁和膜的通透性增加，利于DNA分子的吸附和吸收能增加膜的通透性。;当细菌处于0℃、二价阳离子（如Ca2+、Mg2+等）低渗溶液中时，细菌细胞膨胀成球形，处于感受态；此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面而利于进入，在丰富培养基中生长数小时后，球状细胞恢复原状并繁殖。
简单，但转化效率不高（106-108/?gDNA）。
;其基本原理是利用电穿孔仪的高压电脉冲作用，在大肠杆菌细胞膜上进行电穿孔，形成可逆的瞬间的通道，从而促进外源DNA的有效吸收。
转化效率受电场强度、脉冲时间和外源DNA浓度的影响。
;辅助菌（含有结合型辅助质粒）;影响转化率的因素
a：重组DNA分子的大小、构型、浓度、纯度及载体与受体细胞的亲和性。
b：菌株类型
c：转化方法：电穿孔法最高，CaCl2诱导法居中，三亲本杂交接合法最低。;二、重组λ噬菌体DNA分子转导大肠杆菌;在体外模拟λ噬菌体DNA分子在受体细胞内发生的一系列特殊的包装反应过程，将重组λ噬菌体DNA分子包装成成熟的具有感染能力的λ噬菌体颗粒的技术。;（2）基本原理;的D基因产物是头部和尾部蛋白，但主要与?DNA进入头部和头部的成熟有关（只占20%）。;E基因突变
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