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2025年食品安全检测师实操试题及答案

一、样品前处理操作（30分）

考核任务：从市售全脂奶粉中提取黄曲霉毒素B?（AFB?），并完成固相萃取净化。

实验材料：全脂奶粉样品（编号S202501）、甲醇（色谱纯）、超纯水、0.1%甲酸水溶液、免疫亲和柱（IAC，AFB?专用）、50mL离心管、漩涡振荡器、离心机（最高转速10000r/min）、氮吹仪、刻度移液管（1mL、5mL）、天平（精度0.001g）。

操作要求：

1.称取样品并记录重量（精确至0.001g）；

2.完成提取液配制（甲醇:水=7:3，体积50mL）；

3.振荡提取、离心、过滤；

4.固相萃取柱活化、上样、淋洗、洗脱；

5.洗脱液浓缩定容至1mL，待上机检测。

评分要点：

称样：取5.000g样品（±0.005g），记录正确（3分）；

提取液配制：甲醇35mL+超纯水15mL（体积比7:3），混合均匀（3分）；

振荡提取：漩涡振荡3min（频率2500r/min），静置10min后10000r/min离心10min（5分）；

过滤：取上清液经0.45μm有机滤膜过滤（2分）；

免疫亲和柱活化：依次用5mL超纯水、5mL0.1%甲酸水溶液润洗（3分）；

上样：以1滴/秒流速过柱（3分）；

淋洗：5mL超纯水淋洗，弃去淋洗液（3分）；

洗脱：5mL甲醇以1滴/秒流速洗脱，收集洗脱液（3分）；

浓缩定容：氮吹至近干（40℃，氮气压力0.1MPa），用甲醇定容至1mL（3分）；

操作规范性：无交叉污染，仪器参数设置正确（2分）。

常见错误及扣分点：

提取液体积比错误（扣2分）；

离心转速不足或时间过短（扣2分）；

免疫亲和柱活化顺序错误（扣2分）；

氮吹温度过高导致AFB?分解（扣2分）。

二、快速检测操作（20分）

考核任务：用胶体金试纸条法检测猪里脊肉中的克伦特罗（瘦肉精），判定样品是否合格（标准限值：≤0.5μg/kg）。

实验材料：猪里脊肉样品（编号M202502）、克伦特罗快速检测试纸条（灵敏度0.5μg/kg）、样品提取液（含5%三氯乙酸）、离心机（4000r/min）、移液器（100μL、1mL）、计时器。

操作步骤：

1.样品处理：称取2g绞碎样品，加入5mL提取液，漩涡振荡2min，4000r/min离心5min，取上清液；

2.试纸条检测：取100μL上清液滴加至加样孔，开始计时；

3.结果判读：510min内观察显色线（C线为质控线，T线为检测线）。

评分要点：

样品处理：称样量2.0g（±0.1g），提取液体积准确（3分）；

振荡与离心：振荡时间≥2min，离心转速与时间符合要求（3分）；

加样：移液器吸液前润洗，加样量100μL（±5μL）（3分）；

计时：严格记录加样后5min、10min的显色状态（3分）；

结果判读：

C线显色，T线显色（阴性，合格）（2分）；

C线显色，T线不显色（阳性，不合格）（2分）；

C线不显色（无效，需重做）（2分）；

操作规范性：避免样品污染，试纸条平放（3分）。

常见错误及扣分点：

提取液体积不足（扣2分）；

离心后取沉淀而非上清液（扣3分）；

判读时间超过10min（扣2分）；

未观察C线直接判T线（扣3分）。

三、仪器分析操作（30分）

考核任务：用高效液相色谱荧光检测器（HPLCFLD）测定市售花生油中的苯并芘（BaP），要求完成仪器参数设置、标准曲线绘制、样品进样及数据处理。

实验条件：

色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；

流动相：乙腈:水=90:10（v/v）；

检测器：激发波长365nm，发射波长410nm；

标准溶液：BaP标准储备液（100μg/mL），稀释为0.1、0.5、1.0、2.0、5.0ng/mL的系列标准工作液。

操作要求：

1.仪器开机与平衡：检查流动相、柱温箱（30℃）、检测器参数，平衡30min至基线稳定；

2.标准曲线测定：按浓度由低到高进样（10μL），记录峰面积；

3.样品处理：称取2g花生油，用正己烷溶解，经中性氧化铝柱净化（洗脱液为正己烷:二氯甲烷=9:1），收集洗脱液并氮吹至1mL；

4.样品测定：进样10μL，记录峰面积；

5.数据处理：计算样品中BaP含量（μg/kg），保留3位有效数字。

评分要点：

仪器准备：流动相脱气（超声30min），柱温设置30℃（2分）；

基线平衡：