第十一章荧光分析法.pptVIP

§2荧光定量分析方法一、荧光强度与物质浓度的关系I0IF①在ECl≤0.05时，F=KC,溶液的荧光强度与溶液中荧光物质的浓度呈线性关系；②在ECl＞0.05，溶液的荧光强度与溶液中荧光物质的浓度不呈线性关系；③荧光分析法的测定灵敏度高。第30页，共46页，星期日，2025年，2月5日泰勒级数展开即吸收的强度入射的出射的A=kbc定量关系第31页，共46页，星期日，2025年，2月5日通常A0.05If与A的关系A与c正比，低浓度泰勒级数展开，仅取一项，x越小越符合定量关系第32页，共46页，星期日，2025年，2月5日二、定量分析法⒈校正曲线法⒉比例法第33页，共46页，星期日，2025年，2月5日第1页，共46页，星期日，2025年，2月5日荧光*/bbs荧光的产生发射与激发光谱荧光仪器定量关系荧光效率第2页，共46页，星期日，2025年，2月5日概述用荧光来进行定性定量的分析方法——荧光分析法。光照分子基态激发态辐射跃迁荧光可见-紫外光源分子荧光分析由荧光波长可确定物质分子结构由荧光强度可测物质的含量第3页，共46页，星期日，2025年，2月5日§1荧光分析法基本原理一、分子荧光（一）、分子荧光的产生分子在辐射能的照射下，电子跃迁至单重激发态，并以无辐射弛豫方式回到第一单重激发态的最低振动能级，由此再跃回基态或基态中其它振动能级时所发出的光。第4页，共46页，星期日，2025年，2月5日基态和激发态单重态和三重态辐射跃迁（光）和无辐射跃迁（热）激发单重态：用S表示，↑↓受激电子的自旋方向不变，与基态电子自旋方向相反。激发三重态：用T表示，↑↑受激电子自旋反转，与基态电子自旋方向平行。概念单重基态激发单重态激发三重态第5页，共46页，星期日，2025年，2月5日单线态与三线态Mg的基态与第一激发态3s3p单线态S0单线态S1三线态T1S1→S0荧光辐射T1→S0磷光辐射禁阻跃迁，改变自旋后S1T1S0S0第6页，共46页，星期日，2025年，2月5日激发单重态S与激发三重态T的不同点：

1.能量高2.激发单重态平均寿命短，tS=10-8s,3.基态单重态到激发单重态的激发为允许跃迁1.能量低2.激发三重态平均寿命长，tS=10-4--1s,3.基态单重态到激发三重态的激发为禁阻跃迁激发单重态S激发三重态T第7页，共46页，星期日，2025年，2月5日去活化过程辐射跃迁无辐射跃迁振动弛豫内转换体系间跨越猝灭荧光磷光第8页，共46页，星期日，2025年，2月5日荧光形成机制单重态第二激发态第一激发态三重态荧光磷光内转换体系跨越振动弛豫基态振动弛豫第9页，共46页，星期日，2025年，2月5日荧光产生过程荧光的产生eeee第10页，共46页，星期日，2025年，2月5日荧光磷光处于第一电子激发单重态最低振动能级的分子发射光量子回到基态各振动能级，这一过程为荧光发射处于第一电子激发三重态最低振动能级的分子发射光量子回到基态各振动能级，这一过程为磷光发射。不同点起源不同波长不同寿命不同第11页，共46页，星期日，2025年，2月5日吸收峰磷光峰荧光峰第12页，共46页，星期日，2025年，2月5日激发光源单色器Ⅰ样品池It