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发酵工程制药技术
蛋白纯化新技术—磁珠法
随着近年来生物行业的飞速发展，蛋白纯化是很多生物行业研究人员经常遇到的实验，当我们利用微生物或细胞表达出目标蛋白后，下一步就需要将该目标蛋白从含有众多杂蛋白或其它杂质的发酵液中纯化出来。纯化蛋白最传统的方法主要使用的是层析的方式，该方式由于技术成熟，层析填料种类比较完善，容易进行放大生产，因此其作为蛋白纯化最广泛使用的方法的地位毫无动摇。然而，对于前期的研发阶段，面对大量的样品，如果使用层析的方法，则会耗费大量的时间用于重复纯化过程，不利于效率的提升，因此本文通过介绍一种新型的可用于蛋白高通量纯化的方法—磁珠纯化方法。
磁珠纯化的工作原理：磁珠可以被抗原、抗体、蛋白质或者核酸的特异性亲和配体通过共价键的方式偶联包裹，实现磁珠可以从含有目标物质的样品中对该目标物质特异性的结合，并且在外界磁场的吸引下可以做定向移动，从而达到分离、检测、纯化的目的。
磁珠纯化与传统预装柱纯化蛋白对比：
?操作的方便性
以从大肠杆菌中纯化亲和标签蛋白为例，磁珠纯化蛋白简化实验操作，无需高速离心、过滤、上样等操作，仅需要孵育、洗涤、洗脱步骤。而使用层析的方式则需要将大肠杆菌破碎液离心，并将收集的上清液过滤，上样，洗杂，洗脱步骤，其纯化过程相对繁琐。
②操作时间
时间是科研的高成本，传统预装柱纯化一个蛋白需要2~4h，而磁珠纯化蛋白仅需要不到1小时的时间，磁珠纯化蛋白更加节省时间成本。此外使用磁珠纯化蛋白时一个人可以同时纯化十几个甚至几十个样品，真正的实现高通量纯化；而使用层析的方式则受限于仪器一次只能纯化一个样品，纯化多个样品时则只能通过增加仪器数量或者延长纯化时间进行。
?纯化设备
实验室实验条件有限，没有完善的仪器设备是困扰很多蛋白纯化研究人员最重要的难题。一般来说，使用层析的方式纯化蛋白需要高速离心机、AKTA蛋白纯化仪，这些仪器相对昂贵，并且在设备的使用和维护上需要花费较多精力。而磁珠纯化蛋白仅需要孵育器、磁性分离器这种小型的实验设备即可，使蛋白纯化更加简单方便和低成本。
④纯化效果
省时、操作简便、设备简单在蛋白纯化过程中属于锦上添花，作为蛋白纯化实验本身来说，纯化效果才是重中之重！根据磁珠和层析的方法纯化蛋白的经验，对于蛋白浓度高(0.5mg/mL)的样品，磁珠纯化的蛋白回收率一般会高于层析的方法，而对于蛋白浓度含量低(0.1mg/mL)的样品，磁珠纯化的蛋白回收率一般会低于层析的方法。
⑤做免疫沉淀(IP)实验
免疫共沉淀属于一种与抗原和抗体之间的专一性作为基础，用于研究蛋白质相互作用的方式，同时也可以确定两种蛋白质完整细胞内生理性相互作用的方法。使用磁珠代替传统填料的方式做免疫沉淀的优点见下图。
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