第一章 色谱分析法 (2).pptVIP

食品学院第*页食品学院第一章色谱分析法第1页，共32页，星期日，2025年，2月5日本章重点：1.理解色谱分离的基本原理；2.掌握色谱法的基本概念和术语；3.掌握色谱法的定性和定量方法;4.掌握气相\液相色谱的分析原理、仪器结构 和在食品分析中的应用.第2页，共32页，星期日，2025年，2月5日描述:色谱法是一种分离技术.混合物最有效的分离、分析方法.色谱法分离发生在色谱柱上.一.色谱法导论第3页，共32页，星期日，2025年，2月5日早在1906年,俄国植物学家茨维特对植物叶的色素成分进行研究时,使用右图装置来进行色素分离:将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入石油醚使其自由流下,结果色素中各组分互相分离形成各种颜色的谱带.这种分离物质的方法因此得名为色谱法.1概述第4页，共32页，星期日，2025年，2月5日气相色谱仪液相色谱仪第5页，共32页，星期日，2025年，2月5日色谱柱：色谱法的核心部件，混合物在此实现分离。填充柱毛细管柱第6页，共32页，星期日，2025年，2月5日当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。第7页，共32页，星期日，2025年，2月5日2色谱法分类(1)气相色谱：流动相为气体（称为载气）。按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱按色谱柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；(2)液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。第8页，共32页，星期日，2025年，2月5日(3)其他色谱方法薄层色谱和纸色谱：用于初步定性的色谱方法凝胶色谱法：测聚合物分子量分布超临界色谱:CO2流动相高效毛细管电泳:九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器第9页，共32页，星期日，2025年，2月5日3色谱法的特点（1）分离效率高复杂混合物，有机同系物、异构体、手性异构体。高效液相色谱分离复杂单糖第10页，共32页，星期日，2025年，2月5日（2）灵敏度高可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。（3）分析速度快一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。（4）应用范围广气相色谱：沸点低于400℃、结构稳定的各种有机或无机试 样的分析。液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。第11页，共32页，星期日，2025年，2月5日（一）组分分离当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。4色谱曲线图及有关术语第12页，共32页，星期日，2025年，2月5日（二）色谱流出曲线和色谱峰由检测器输出的信号强度对时间作图，所得曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起部分就是色谱峰。第13页，共32页，星期日，2025年，2月5日色谱流出曲线和色谱峰基线：在实验操作条件下，色谱柱后没有样品组分流出时的流出曲线称为基线，稳定的基线应该是一条水平直线。峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以（h）表示。第14页，共32页，星期日，2025年，2月5日（五）保留值1.死时间tM不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间称为死时间，它正比于色谱柱的空隙体积，如下图。信号进样tM第15页，共32页，星期日，2025年，2月5日2.保留时间tR试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间，如下图。由于组分在色谱柱中的保留时间tR包含了组分随流动相通过柱子所需的时间和组分在固