林木低温胁迫冰核活性细菌 iceA 基因表达载体构建与功能验证试题库及答案.docVIP

林木低温胁迫冰核活性细菌iceA基因表达载体构建与功能验证试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.构建基因表达载体时常用的工具酶不包括（）

A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.淀粉酶D.以上都不对

2.iceA基因主要存在于（）

A.植物细胞B.冰核活性细菌C.真菌D.病毒

3.下列哪种是常用的基因表达载体（）

A.质粒B.线粒体C.叶绿体D.核糖体

4.功能验证中常采用的方法是（）

A.染色B.测序C.转化D.离心

5.低温胁迫对林木的直接影响是（）

A.生长加快B.细胞膜损伤C.光合作用增强D.呼吸作用减弱

6.构建表达载体的基本步骤顺序是（）

A.酶切、连接、转化B.连接、酶切、转化C.转化、酶切、连接D.无固定顺序

7.冰核活性细菌促进（）形成

A.冰晶B.蛋白质C.核酸D.多糖

8.基因表达载体构建的关键是（）

A.选择合适的启动子B.选择合适的终止子C.选择合适的标记基因D.以上都是

9.验证基因功能通常是观察（）变化

A.细胞大小B.表型C.细胞壁厚度D.细胞核大小

10.提取iceA基因常用的方法是（）

A.研磨法B.离心法C.PCR技术D.过滤法

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.构建iceA基因表达载体需要的材料有（）

A.含iceA基因的DNA片段B.表达载体C.工具酶D.抗生素

2.以下属于低温胁迫对林木危害的有（）

A.细胞膜透性改变B.酶活性降低C.光合作用受阻D.呼吸作用紊乱

3.基因表达载体的组成部分包括（）

A.启动子B.目的基因C.终止子D.标记基因

4.验证iceA基因功能的方法有（）

A.基因敲除B.过表达C.RNA干扰D.蛋白质电泳

5.冰核活性细菌的特点有（）

A.能提高水的结冰温度B.广泛存在C.对林木无害D.可促进冰晶形成

6.常用的限制性内切酶特点有（）

A.识别特定的核苷酸序列B.切割DNA双链C.可产生粘性末端D.可产生平末端

7.构建基因表达载体过程中可能遇到的问题有（）

A.酶切不完全B.连接效率低C.载体自连D.转化失败

8.筛选含重组表达载体的宿主细胞方法有（）

A.抗生素筛选B.蓝白斑筛选C.测序筛选D.显微镜观察

9.影响iceA基因表达的因素有（）

A.温度B.光照C.宿主细胞类型D.载体元件

10.林木应对低温胁迫的自身调节机制包括（）

A.合成抗冻蛋白B.积累渗透调节物质C.提高抗氧化酶活性D.改变细胞膜脂肪酸组成

三、判断题（每题2分，共10题）

1.冰核活性细菌能降低水的结冰温度。（）

2.构建基因表达载体不需要考虑启动子。（）

3.低温胁迫不会影响林木的生长发育。（）

4.所有细菌都含有iceA基因。（）

5.功能验证只能通过基因过表达来进行。（）

6.DNA连接酶能连接任意两个DNA片段。（）

7.表达载体上的标记基因用于筛选含载体的细胞。（）

8.林木在低温胁迫下，呼吸作用一定增强。（）

9.提取iceA基因只能从冰核活性细菌中获取。（）

10.基因表达载体构建成功就意味着功能验证成功。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述构建iceA基因表达载体的主要步骤。

答：先获取含iceA基因的DNA片段，用限制性内切酶对其和表达载体进行酶切，再用DNA连接酶将目的基因与载体连接，最后转化到宿主细胞。

2.说明低温胁迫对林木生理指标的影响。

答：低温使林木细胞膜透性改变，酶活性受抑制，光合作用和呼吸作用紊乱，还会影响物质运输等生理过程，严重时导致林木受损甚至死亡。

3.简述验证iceA基因功能的基本思路。

答：通过基因过表达、基因敲除或RNA干扰等技术改变iceA基因的表达水平，观察林木在低温胁迫下的表型、生理指标等变化，以此验证其功能。

4.为什么选择质粒作为基因表达载体？

答：质粒具有自主复制能力，能在宿主细胞内稳定存在，有多个限制酶切点便于插入目的基因，还有标记基因方便筛选，所以常被选作基因表达载体。

五、讨