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林木转基因CRISPR表观遗传编辑(CRISPRoff/on)效率检测试题库及答案
一、单项选择题(每题2分,共10题)
1.CRISPRoff主要通过什么机制调控基因表达?
A.切割DNAB.甲基化修饰C.乙酰化修饰
答案:B
2.以下哪种不是检测CRISPR编辑效率常用技术?
A.测序B.WesternblotC.ELISA
答案:C
3.CRISPRon作用是?
A.抑制基因表达B.激活基因表达C.突变基因
答案:B
4.检测表观遗传修饰变化常用方法是?
A.PCRB.亚硫酸氢盐测序C.凝胶电泳
答案:B
5.林木转基因常用载体是?
A.质粒载体B.病毒载体C.Ti质粒
答案:C
6.衡量编辑效率关键指标是?
A.载体大小B.目标位点编辑比例C.实验时间
答案:B
7.影响CRISPR编辑效率因素不包括?
A.温度B.引物长度C.细胞类型
答案:B
8.检测CRISPR编辑导致的蛋白表达变化首选?
A.免疫荧光B.荧光定量PCRC.质谱分析
答案:A
9.CRISPR系统源自?
A.动物免疫系统B.植物防御机制C.细菌免疫系统
答案:C
10.检测基因编辑是否成功最直接方法是?
A.观察表型B.检测DNA序列C.检测RNA水平
答案:B
二、多项选择题(每题2分,共10题)
1.检测CRISPRoff/on效率的方法有?
A.荧光定量PCRB.基因测序C.甲基化特异性PCR
答案:ABC
2.影响林木转基因效率因素有?
A.树种B.转化方法C.培养条件
答案:ABC
3.表观遗传修饰类型包括?
A.DNA甲基化B.组蛋白修饰C.非编码RNA调控
答案:ABC
4.常用的基因编辑技术有?
A.CRISPR/Cas9B.TALENC.ZFN
答案:ABC
5.分析CRISPR编辑后基因表达变化的手段有?
A.RNA-seqB.基因芯片C.蛋白质组学
答案:ABC
6.以下哪些属于CRISPR系统组件?
A.Cas蛋白B.gRNAC.启动子
答案:AB
7.提高CRISPR编辑效率策略有?
A.优化gRNA设计B.选择合适细胞系C.调整实验参数
答案:ABC
8.检测CRISPR编辑导致的染色体变化技术有?
A.染色体核型分析B.FISHC.脉冲场凝胶电泳
答案:ABC
9.林木转基因目的包括?
A.提高抗逆性B.改良品质C.增加产量
答案:ABC
10.研究CRISPR编辑对林木表型影响实验设计要点有?
A.设立对照B.多代观察C.不同环境条件
答案:ABC
三、判断题(每题2分,共10题)
1.CRISPRoff只能用于抑制基因表达。()
答案:对
2.检测编辑效率只需要检测DNA水平变化。()
答案:错
3.林木转基因过程中,Ti质粒可随机整合到基因组。()
答案:对
4.表观遗传修饰不会改变DNA序列。()
答案:对
5.所有细胞对CRISPR编辑的响应都一样。()
答案:错
6.荧光定量PCR可准确检测基因编辑效率。()
答案:错
7.CRISPR系统在植物和动物中作用机制不同。()
答案:错
8.检测蛋白质表达变化就能完全确定编辑效率。()
答案:错
9.优化gRNA设计能提高CRISPR编辑特异性。()
答案:对
10.林木转基因一定会带来预期的表型变化。()
答案:错
四、简答题(每题5分,共4题)
1.简述检测CRISPRoff/on效率的主要方法及原理。
答案:主要方法有测序,通过测定目标位点序列看编辑情况;荧光定量PCR,利用荧光信号检测基因转录水平变化;甲基化特异性PCR检测表观遗传修饰。原理分别是测序直接测碱基,荧光定量PCR基于荧光信号与核酸量关系,甲基化特异性PCR针对甲基化位点设计引物。
2.简述影响林木转基因CRISPR编辑效率的主要因素。
答案:包括树种自身特性,不同树种对转化和编辑的接受程度有差异;gRNA设计,合适的gRNA提高靶向性;转化方法,不同方法转化效率不同;细胞类型,不同细胞状态对编辑响应不同。
3.简述表观遗传修饰在CRISPR编辑中的作用。
答案:表观遗传修饰如DNA甲基化、组蛋白修饰等,能调控基因表达。CRISPRoff
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