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EB病毒感染实验室诊断及临床应用专家共识

EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)为疱疹病毒科,疱疹病毒IV型，是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒。EBV是双链DNA病毒，基因组长约172kb，在病毒颗粒中呈线性分子，进入受感染细胞后，其DNA发生环化并能自我复制。淋巴细胞中潜伏感染的EBV可表达2种不翻译成蛋白质的RNA,包括EBER1和EBER2,6种核抗原,2种潜伏期膜蛋白,包括LMP1、LMP2A/B。

EBV在人群中感染非常普遍，约90%以上的成人血清EBV抗体阳性。除原发性EBV感染可致传染性单核细胞增多症外，EBV还引起慢性活动性EBV感染和EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症等非肿瘤性重症EBV相关疾病。EBV还是一种致肿瘤病毒，与许多肿瘤的发生相关，如霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤，鼻咽癌，胃癌和移植后淋巴细胞增殖症等。

01、EBV感染实验室诊断方法

1.EBV特异性抗体检测：EBV编码多种结构抗原，包括病毒衣壳抗原、早期抗原、膜抗原、核抗原等。机体感染EBV后针对不同的抗原产生相应的抗体。对于免疫功能正常的患者,一般情况下结合抗VCA-IgM、抗VCA-IgG和抗EBNA-IgG3个抗体的检测结果可以区分EBV原发感染和既往感染：抗VCA-IgG、抗VCA-IgM抗体阳性而抗EBNA-IgG阴性提示EBV原发感染,抗VCA-IgM阴性而抗VCA-IgG和抗EBNA-IgG阳性则是典型的EBV既往感染抗体类型。

2.嗜异凝集抗体检测：嗜异凝集抗体为IgM抗体，在病程第1-2周出现，在病程5周内达到高峰，随后迅速下降，

但是少数患者可以持续约6-12个月。在成人和青少年，85%-90%原发性EBV感染者会出现嗜异凝集抗体；但是大约只有50%的2-5岁儿童原发性EBV感染后此抗体为阳性，而小于2岁的儿童原发性EBV感染后此抗体的阳性率仅10%-30%。此抗体检测缺乏特异性，其他急性感染如原发性巨细胞病毒感染、自身免疫性疾病或肿瘤等也可能呈阳性反应。国内儿童IM的发病高峰年龄为4-6岁，因此该抗体检测在国内儿童IM的诊断中价值不大。因此，不推荐用于国内儿童EBV原发性感染所致IM的诊断。

3.EBV核酸载量检测EBV-DNA:血清或血浆中EBV-DNA阳性提示患者体内存在活动性EBV感染或疾病与EBV密切相关(如原发EBV感染早期、EBV-HLH、大多数CAEBV、EBV相关肿瘤等)，需结合临床表现及其他检查结果综合分析判断；血清或血浆EBV-DNA阴性提示为血清阳性转化的EBV健康携带者、未感染过EBV的患者、非EBV相关疾病患者、以及部分EBV相关疾病患者，如部分IM患者及IM后期，极少数CAEBV患者(结合血清学判定)。

外周血PBMC中EBV-DNA载量高于10^2.5拷贝/μgDNA是CAEBV的诊断标准之一。全血样本EBV-DNA载量主要用于免疫缺陷患者EBV感染的诊断，以提高诊断EBV感染的敏感性，不推荐用于有免疫力的患者。因血清EBV阳性转化的健康携带者每10^6个PBMC中大约有1-50个EBV感染的细胞,约7个拷贝(1-30个拷贝)EBV-DNA/10^6PBMC。因此，血清阳性转化的EBV健康携带者的全血或PBMC标本中可能检出低水平的EBV-DNA载量。

4.EBERs原位杂交试验:EBERs)是EBV编码的不翻译

成蛋白质的RNA。EBERs大量存在于EBV潜伏感染的细胞中，每个细胞可达10^6-10^7拷贝，是EBV潜伏感染的最好标志物，其主要功能是抑制干扰素介导的抗病毒效应和凋亡。原位杂交检测EBERs能够定位EBV感染的细胞类型，是明确肿瘤与EBV相关的金标准。

02、临床应用

1.原发性EBV感染相关疾病IM是原发性EBV感染引起的良性自限性疾病，其典型临床表现为发热、咽峡炎和颈淋巴结肿大的“三联征”，外周血淋巴细胞显著增多并出现异型淋巴细胞，可合并肝脾肿大和肝功能异常。多数预后良好，少数可出现严重并发症，如噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)。对于免疫功能正常的患者，EBV特异性抗体检测仍然是诊断IM的金标准。同时检测患者血清中3种EBV特异性抗体(抗VCA-IgM/IgG、抗EBNA-IgG),并结合抗VCA-IgG亲和力检测，可提高原发性EBV感染诊断的敏感性。IM的EBV特异性抗体检测指标包括:(1)抗VCA-IgM和抗VCA-IgG阳性,且抗EBNA-IgG阴性;或(2)抗VCA-IgM阴性，但抗VCA-IgG阳性，且为低亲和力抗体。

IM患者PB