低温微生物保存方法.docxVIP

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(二)低温对微生物的影响

大多数微生物对低温有较强的抵抗力,能保持活力,但代谢活动降低,甚至停止,不繁殖,在升温后可恢复,故低温可用于保存菌种和毒种。有少数病原对低温特敏感,比室温死亡更快,如多杀性巴氏杆菌,脑膜炎双球菌。常用的低温保存法有:

1、冰箱中0~4℃保存:常保存菌种,一般细菌、酵母菌、霉菌的斜面培养物。

2、速冻保存(超低温冰箱-70℃、液氮-196℃):菌液中加入10%甘油或牛奶、葡萄糖、明胶后速冻。

3、冻干保存:将保存物置于玻璃容器中,低温下迅速冷冻到-70℃,然后抽气机抽去容器内空气,使冷冻物中水分升华而干燥,这样可长期保存病原微生物和其他物质不失活,就是冻干保存。可保存菌种、疫苗、补体、药物等。

例如,将按1:1加入了蔗糖、牛奶的微生物培养液,迅速冷却到-70℃,抽去空气,可保存细菌。但是低温保存有一定的时间范围,超过一定时间微生物会死亡;对细菌和真菌长期冷冻保存也会失活而死亡;反复冻融可促使微生物死亡。

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