江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白编码基因的克隆和表达分析.pdfVIP

江苏农业科学２０２３年第５１卷第１期—５７—

张艺欣，聂蒙，钱华卉，等．江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白编码基因的克隆和表达分析［Ｊ］．江苏农业科学，２０２３，５１（１）：５７－６２．

ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２３．０１．００８

江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白编码基因

的克隆和表达分析

１，２，３，４１１１１１１

张艺欣，聂蒙，钱华卉，邱莉，桑智癑，陶月琴，涂辰钰

（１．上饶师范学院生命科学学院，江西上饶３３４００１；２．上饶农业技术创新研究院，江西上饶３３４００１；

３．上饶市药食同源植物资源保护与利用重点实验室，江西上饶３３４００１；

４．上饶市薯芋类作物种质保存与利用重点实验室，江西上饶３３４００１）

摘要：旨在通过对江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白编码基因进行克隆和表达分析，为揭示江西铅山红芽芋植物

抗病反应蛋白的生物学功能提供理论依据。从江西铅山红芽芋试管苗转录组数据库中筛选到江西铅山红芽芋植物抗

病反应蛋白编码基因的核心片段，用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）技术克隆江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白编码基因，

并采用生物信息学方法和实时定量ＰＣＲ进行序列分析和器官表达分析。结果表明，江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋

白编码基因的ｃＤＮＡ总长度为５３４ｂｐ，Ｇ＋Ｃ含量为５８．０５％；江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白由１７７个氨基酸组

成，相对分子量为１９３６９．１３ｕ，等电点为６．０９，为疏水性蛋白；二级结构由－螺旋（１５．２５％）、－片层（２７．６８％）、无

αβ

规则卷曲（５７．０６％）构成；三级结构为同源三聚体；江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白主要存在于细胞质、叶绿体中；

江西铅山红芽芋植物抗病反应蛋白在进化上与芋（Ｃｏｌｏｃａｓｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａ）的亲缘关系较近，尤其是与Ｃ．ｅｓｃｕｌｅｎｔａ

ｈｙｐｏｔｈｅｔｉｃａｌｐｅｏｔｅｉｎＴａｒｏ＿０４６１９５（ＭＱＭ１３２７０．１）在进化上具有最高的亲缘关系。实时定量ＰＣＲ结果显示，植物抗病反

应蛋白编码基因在江西铅山红芽芋中的表达存在器官特异性，在茎、球茎膨大末期的表达量最高。由结果可知，江西

铅山红芽芋植物抗病反应蛋白具有典型的植物抗病反应蛋白的结构特征，氨基酸序列及核酸序列与同源物种的相似

度较高，在进化上高度保守，对进一步揭示该酶的生物学功能具有重要意义。

关键词：江西铅山红芽芋；植物抗病反应蛋白；基因克隆；表达分析

中图分类号：Ｓ６３２．３０１文献标志码：Ａ文章编号：１００２－１３０２（２０２３）０１－００５７－０６

江西铅山红芽芋（ＣｏｌｏｃａｓｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａＬ．Ｓｃｈｏｏｔ营养全面，粉糯爽口，具有宽肠胃、补脾胃、消痨散

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