马铃薯甲虫谷胱甘肽转移酶家族基因解析：鉴定、特征及杀虫剂响应机制.docxVIP

马铃薯甲虫谷胱甘肽转移酶家族基因解析：鉴定、特征及杀虫剂响应机制

一、引言

1.1研究背景

马铃薯甲虫（Leptinotarsadecemlineata(Say)），又名马铃薯叶甲、蔬菜花斑虫，隶属鞘翅目叶甲科，是全球重要的检疫性害虫，被列为全球最危险的入侵害虫之一，也是《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》所规定的检疫性害虫。1811年，马铃薯甲虫首次在美国西部被发现，起初它主要以刺萼龙葵为食，未被视为害虫。随着美国西部的开发，种植业和运输业的发展，马铃薯被引入，马铃薯甲虫转而危害马铃薯。1859年，马铃薯甲虫在内布拉斯加州东部奥马哈西约160km的地方第一次大规模爆发，1860年在堪萨斯州的马铃薯种植区也被发现，至此被认定为马铃薯上的害虫。1993年，我国新疆伊犁地区首次发现马铃薯甲虫，目前我国已有3个省的45个县发现其踪迹，且其入侵危害范围呈逐渐扩大的趋势。

马铃薯甲虫具有繁殖快、抗逆性强、传播途径多、传播速度快等特点，这导致对其监测和防控的难度增大。它危害包括马铃薯、茄子、番茄在内的多种茄科植物，能够对马铃薯等农作物造成毁灭性危害。马铃薯甲虫幼虫的取食量随龄期的增加而明显增加，1-4龄幼虫的取食量分别占幼虫时期取食总量的2%、4%、19%、75%，即主要以3龄后幼虫及成虫暴食寄主，可造成马铃薯减产30%-50%，严重的地方造成90%的产量损失，甚至绝收。据统计，2010年马铃薯甲虫在我国新疆维吾尔自治区对马铃薯、茄子和番茄造成的年度经济损失达到两千多万元，给我国农业生产带来了严重的经济损失。

目前，化学防治仍是马铃薯甲虫防治的主要方法，但长期大量使用杀虫剂导致马铃薯甲虫对很多杀虫剂都产生了抗药性，并且它们的抗药能力也在不断增强。例如，马铃薯甲虫对有机磷与菊酯类杀虫剂的抗药性逐渐增强，这使得传统杀虫剂的防治效果大打折扣。因此，深入研究马铃薯甲虫的抗药性机制，寻找新的防治靶点和策略具有重要的现实意义。

谷胱甘肽转移酶（GlutathioneS-transferases，GSTs）是一类广泛分布于生物体的多功能解毒酶系，参与许多内外源有毒物质的代谢。在昆虫中，GSTs目前主要分为6个已知亚族，其中Delta和Epsion是昆虫特异的亚族，已鉴定的抗性相关基因主要分属于这两个亚族。作为重要的解毒酶，GSTs主要参与昆虫对有机磷、拟除虫菊酯和有机氯等杀虫剂的抗性形成。在抗性昆虫种群中，GSTs表达量的增加有mRNA水平的提高和基因扩增两种机制，GSTs活性的增加是由于属于一类或多类的多个同工酶的增量调控，也有少数是由于单个同工酶的增量调控。研究表明，GSTs在昆虫抗药性的形成和发展过程中发挥着关键作用，对其进行深入研究有助于揭示昆虫抗药性的分子机制。

1.2研究目的与意义

本研究旨在对马铃薯甲虫谷胱甘肽转移酶家族基因进行全面鉴定，深入分析其基因结构、系统进化、理化性质、基因结构、保守基序等特征，并探究这些基因在不同发育阶段和组织中的表达模式，以及在三种杀虫剂胁迫下的响应情况。

通过本研究，有望进一步明确谷胱甘肽转移酶家族基因在马铃薯甲虫抗药性形成中的作用机制，为开发基于基因靶点的新型杀虫剂或抗药性治理策略提供理论依据。这对于解决马铃薯甲虫的抗药性问题，提高马铃薯等茄科作物的产量和质量，保障农业生产的可持续发展具有重要的意义。同时，也为其他昆虫抗药性研究提供参考和借鉴，丰富昆虫生理生化及分子生物学的理论知识。

二、马铃薯甲虫及谷胱甘肽转移酶概述

2.1马铃薯甲虫简介

马铃薯甲虫属鞘翅目叶甲科瘦跗叶甲属，是世界公认的马铃薯毁灭性食叶害虫，也是中国对外重大检疫对象和外来入侵生物之一。其成虫体长9-12毫米，宽6-7毫米，短卵圆形，体背显著隆起，呈淡黄色至红褐色，具多数黑色条纹和斑。头顶黑斑多呈三角形，复眼后方有一黑斑，通常被前胸背板遮盖。口器淡黄色至黄色，上颚端部黑色，下颚须末端色暗，触角11节。前胸背板隆起，鞘翅卵圆形且显著隆起，每一鞘翅有5个黑色纵条纹，从翅基部延伸到翅端。雌雄两性外形差别不大，雌虫个体一般稍大，雄虫最末端腹板比较隆起，具一凹线，雌虫无此特征。

马铃薯甲虫以成虫在土壤内越冬，4、5月，当越冬处土温回升到14-15℃时，成虫出土，在植物上取食、交尾。其寄主主要是茄科植物，大部分是茄属，其中栽培的马铃薯是最适寄主，此外还可为害番茄、茄子、辣椒、烟草等。成虫和幼虫均贪食，主要取食马铃薯叶片和嫩尖，常常将叶片吃光，尤其是在马铃薯始花期至薯块形成期受害，对产量影响最大，严重时可造成绝收，一般可导致马铃薯减产30%-50%，严重地区减产90%。

该虫原产于美国落基山山脉东坡，现广泛分布于欧美和亚洲的