DB33-T 705-2008 农产品中苯并咪唑类农药残留量的测定 高效液相色谱法.docxVIP

DB33T7052008农产品中苯并咪唑类农药残留量的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了农产品中多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、苯菌灵、托布津等苯并咪唑类农药残留量的高效液相色谱测定方法。

本标准适用于蔬菜、水果、粮食等农产品中苯并咪唑类农药残留量的测定。

本方法的检出限：多菌灵为0.01mg/kg，噻菌灵为0.01mg/kg，甲基硫菌灵为0.02mg/kg，苯菌灵为0.02mg/kg，托布津为0.02mg/kg。

2原理

试样中的苯并咪唑类农药残留用乙腈提取，经氨基固相萃取柱净化，以甲醇水为流动相，采用C18色谱柱分离，用高效液相色谱紫外检测器测定，外标法定量。

3试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1乙腈：色谱纯。

3.2甲醇：色谱纯。

3.3氯化钠：优级纯。

3.4无水硫酸钠：650℃灼烧4h，冷却后贮于干燥器中备用。

3.5氨水：质量分数为25%~28%。

3.6甲酸：色谱纯。

3.7氨基固相萃取柱：500mg/6mL，或相当者。

3.8微孔滤膜：0.45μm，有机相。

3.9苯并咪唑类农药标准品：多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、苯菌灵、托布津，纯度均≥98%。

3.10标准储备溶液：分别准确称取适量各农药标准品，用甲醇溶解并定容至100mL，配制成100mg/L的标准储备溶液，于4℃避光保存，有效期3个月。

3.11混合标准工作溶液：准确吸取适量各农药标准储备溶液，用甲醇稀释成适当浓度的混合标准工作溶液，现用现配。

4仪器和设备

4.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。

4.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。

4.3组织捣碎机。

4.4均质器：转速不低于10000r/min。

4.5离心机：转速不低于4000r/min。

4.6旋转蒸发仪。

4.7氮吹仪。

4.8固相萃取装置。

4.9超声波清洗器。

4.10涡旋混合器。

4.11pH计：精度±0.02。

4.12具塞离心管：50mL、100mL。

4.13容量瓶：10mL、25mL、50mL、100mL。

4.14移液管：1mL、2mL、5mL、10mL。

4.15浓缩瓶：100mL、250mL。

5试样制备与保存

5.2粮食：取代表性样品约500g，用粉碎机粉碎后过425μm标准筛，混匀后装入洁净容器中，密封后于室温下避光保存。

5.3在制样和保存过程中，应防止样品受到污染或发生待测组分的变化。

6分析步骤

6.1提取

6.1.1蔬菜、水果：称取10.0g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入20mL乙腈，均质提取2min，加入4g氯化钠，涡旋混合1min，以4000r/min离心5min，取上清液待净化。

6.1.2粮食：称取5.0g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入10mL水，浸泡30min，加入20mL乙腈，均质提取2min，加入4g氯化钠，涡旋混合1min，以4000r/min离心5min，取上清液待净化。

6.2净化

6.2.1氨基固相萃取柱先用5mL乙腈活化，取6.1中上清液10mL过柱，收集流出液。

6.2.2再用5mL乙腈洗脱，合并流出液，于40℃下旋转蒸发至近干，用氮气吹干。

6.2.3残渣用1.0mL甲醇溶解，涡旋混合30s，经0.45μm微孔滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

6.3测定

6.3.1色谱条件

a)色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm（i.d.），5μm，或相当者；

b)流动相：甲醇水（60+40，V/V）；

c)流速：1.0mL/min；

d)柱温：30℃；

e)检测波长：280nm；

f)进样量：20μL。

6.3.2标准曲线的绘制

分别吸取适量混合标准工作溶液，用甲醇稀释成0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L系列标准工作溶液，按6.3.1色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

6.3.3样品测定

6.4空白试验

除不加试样外，按6.1～6.3步骤进行空白试验。

7结果计算

试样中苯并咪唑类农药残留量按式（1）计算：

X=(c×V)/m

式中：

X——试样中苯并咪唑类农药残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

c——从标准曲线上查得的试样溶液中苯并咪唑类农药的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；

V——试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；

m——试样质量，单位为克（g）。

计算结果