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紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法
CONTENTS目录1.认识紫外可见分光光度法2.紫外可见分光光度法基本原理3.紫外可见分光光度计结构4.定量分析实例
定量分析实例标准曲线法
知识目标1.掌握标准曲线法定量分析法的原理和数据处理方法。2.熟悉标准溶液浓度计算。3.了解标准溶液配制。
能力目标1.学会用标准曲线法测定药物含量的基本计算。
思政目标1.通过系统的教学引入紫外可见分光光度法在定性分析、定量分析方面的应用,引导学生突破传统思维,树立信心,发展自主知识产权设备体系。
单组份定量分析适用情形标准曲线法样品较多,吸光系数未知。吸光系数法吸光系数已知。标准对照法标准品昂贵且稀少,标准溶液与试样溶液浓度相近。
标准曲线法标准曲线法(A-c)先配制一系列浓度不同的标准溶液(5~10个)。在相同条件下(合适波长)分别测定每个标准溶液的吸光度。以吸光度A为纵坐标,标准溶液浓度c为横坐标,绘制A-c标准曲线。在相同条件下测定试样溶液的吸光度。根据试样溶液所测得的吸光度,从标准曲线上查出对应的试样溶液浓度或含量。计算原样品的含量百分比或标示量含量百分比。
标准曲线法标准曲线法(A-c)不同浓度标准溶液参比溶液样品
标准曲线法标准曲线法(A-c)例在最大吸收波长下,用1cm吸收池,以不含铁的试剂溶液为参比,分别测量各标准显色溶液和试样显色溶液的吸光度,绘制标准曲线,求出样品铁含量。铁含量μg·mL-1空白0.400.801.201.602.00试样吸收度A0.0000.0780.1620.2400.3180.3990.278
标准曲线法(1)在Excel中,将铁标准溶液含量和相应的吸收度分别输入第一列和第二列单元格,选定数据区,用鼠标点击“插入–图表–X、Y散点图–下一步–完成”,可得两组数据一一对应的散点图,如图所示。
标准曲线法(2)选中散点,单击鼠标右键“添加趋势线”,可得标准曲线。在趋势线格式“选项”框,点击“显示公式”及“显示R2”复选框,如图所示,点击“确定”可得线性回归方程和相关系数。设置坐标轴格式,编辑图表区域格式,即得标准曲线。
标准曲线法(3)试样分析结果根据标准曲线和线性回归方程,可计算吸光度为0.278的样品溶液,含铁量为1.39μg/mL。标准曲线
小结本节主要介绍标准曲线法定量分析的原理,这是一种常用的适用于样品较多的定量分析方法。1重点阐述标准曲线法定量分析过程和数据处理方法。2
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