黄曲霉毒素检测.pptVIP

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第1页,共19页,星期日,2025年,2月5日?黄曲霉毒素(aflatoxin,简称为AF)是到目前为止发现的毒性最大的真菌毒素。它可通过多种途径污染食品和饲料,直接或间接进入人类食物链,威胁人类健康和生命安全,对人体及动物内脏器官尤其是肝脏损害严重,该毒素是黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株的代谢产物,普遍存在于霉变的粮食及粮食制品中。黄曲霉毒素十分耐热,加热至230℃才能被完全破坏,因此一般烹饪加工也不易消除。黄曲霉毒素介绍?第2页,共19页,星期日,2025年,2月5日黄曲霉毒素分布范围广

黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果(特别是花生和核桃中)中。日常检验发现在大豆、谷物、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素(其中以花生和玉米污染最严重)。第3页,共19页,星期日,2025年,2月5日毒性极强

黄曲霉毒素进入人体后主要经消化道吸收,大部分分布在肝脏、肾脏。因此主要引发肝癌、胃癌等,还可以诱发骨癌、肾癌、直肠癌、乳腺癌、卵巢癌等。黄曲霉毒素如不连续摄入,一般不在体内积蓄。一次摄入后约1周将大部分排出。只有严重霉变的粮食才可能会含有大量毒素,导致急性毒性。第4页,共19页,星期日,2025年,2月5日耐热性强

在一般的烹调加工温度下,黄曲霉毒素被破坏的很少;即使是200℃高温加热,也不能完全正确破坏。一般黄曲霉毒素的裂解温度为280℃,黄曲霉毒素B1的裂解温度为268℃。第5页,共19页,星期日,2025年,2月5日黄曲霉毒素的种类迄今为止发现的黄曲霉毒素主要有4种:即B1、B2、C1、G2,其中B1被认为是主要的有毒物质,有2种这些毒素的代谢产物M1和M2。其中黄曲霉毒素B1主要存在于农产品,动物饲料,中药等产品中;黄曲霉毒素M1是动物摄入黄曲霉毒素B1后在体内经羟基化代谢的产物,一部分从尿和乳汁排出,一部分存在于动物的可食部分,如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中,其中以乳最为常见。黄曲霉毒素M1的毒性和致癌性与黄曲霉毒素B1的基本相似。由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食品,所以其危害性更大。第6页,共19页,星期日,2025年,2月5日中国食品中黄曲霉毒素的限量标准

标准食品种类最大限量GB2761-81玉米、花生仁、花生油20μg/kg大米、其他食用油10μg/kg其他粮食豆类、发酵食品5μg/kg婴儿代乳食品不得检出GB9676-88牛乳及其制品0.5μg/kg第7页,共19页,星期日,2025年,2月5日免疫分析法仪器分析法化学分析法生物鉴定法检测方法第8页,共19页,星期日,2025年,2月5日黄曲霉毒素的检测方法

目前,测定食品中的黄曲霉毒素的方法有:薄层层析法、液相色谱法、放射免疫分析法、酶联免疫法、亲和层析法、微柱筛选法、金标试纸法等。这些方法或多或少都具有如下不足之处:?(1)、在操作过程中,需要使用剧毒的黄曲霉毒素M1作为标定标准物,对操作人员造成巨大的沾污危险,而且黄曲霉毒素M1标准物质购买十分困难。?(2)、操作过程烦琐、复杂、时间长,劳动强度大。?(3)、仪器设备昂贵、笨重、操作复杂,难以实现现场快速分析。(4)、灵敏度较差,重复性很难得到满意结果。第9页,共19页,星期日,2025年,2月5日薄层色谱法(TLC)其原理是:样品经提取、浓缩、薄层分离后,在365nm波长的紫外光照射下,黄曲霉毒素B1、B2产生紫色荧光,G1、G2产生绿色荧光,然后根据其在薄层板上显示的荧光的最低检出量来定量。优点是:所用的试剂、设备简单,费用低廉,容易掌握,适用大量样品的分离、筛选,一般的实验室均可开展,属于定性和半定量的功能。第10页,共19页,星期日,2025年,2月5日高效液相色谱法(HPLC)

以C18柱为固定相,以水+异丙醇+乙腈(80+12+8)为流动相,用荧光检测器进行检测,其激发波长365nm,发射波长450nm,以保留时间定性,峰面积定量,这些基本参数大致相同,但在流动相的选用上却差异较大。样品用甲醇和水混合液进行萃取,随后进行衍生化处理,处理后溶解于流动相,进行液相色谱测定。第11页,共19页,星期日,2025年,2月5日酶联免疫吸附法(ELISA)是抗原(抗体)吸附剂和用酶标记的抗体(抗原)与标本中的待测物(抗原和抗体)起特异的免疫学反应,用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度。大致采用两种方式检测黄曲霉毒素,一种是用双抗体夹

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