培养基的制备和灭菌.pptVIP

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**培养基的制备和灭菌第1页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌实验材料1.成份:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂2.试剂:1NNaOH溶液、1NHCl溶液3.仪器:pH试纸、三角瓶、试管、烧杯、玻棒、量筒、纱布、漏斗、台秤、吸管、药匙、棉塞、牛皮纸、灭菌锅等第2页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌 实验步骤原料称量溶解调节pH(加琼脂熔化)塞棉塞、包装(过滤澄清) 灭菌分装第3页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌实验步骤之溶解一般情况下,几种药品可一起到入烧杯内,先加少于计料体积的水进行加热溶解,但如有磷酸盐和钙盐等混合在一起时,易产生磷酸钙和磷酸镁沉淀,所以要分别溶解。加热时要搅拌,完全溶解后补足水分至计料体积。第4页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌 实验步骤原料称量溶解调节pH(加琼脂熔化)塞棉塞、包装(过滤澄清) 灭菌分装第5页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌实验步骤之分装固体试管斜面分装固体培养基三角烧瓶的分装第6页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌 实验步骤原料称量溶解调节pH(加琼脂熔化)塞棉塞、包装(过滤澄清) 灭菌分装第7页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌实验步骤之灭菌高压蒸汽灭菌灭菌条件:一般温度为121℃(压力1kg/cm2)下,维持15~30min。高压蒸汽灭菌原理是水的沸点随着压力的增加而升高。当水在灭菌锅中煮沸,产生蒸汽驱逐出锅内的空气后,随蒸汽的增加,锅内蒸汽压力也随之升高,故而水的沸点也就随着上升,从而获得高于100℃的温度,达到灭菌效果。注:使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时,锅内的冷空气必须排除。第8页,共12页,星期日,2025年,2月5日培养基的制备和灭菌高压蒸汽灭菌步骤1.放灭菌物件,加盖,旋紧螺丝,密闭灭菌锅内;2.加水到要求的刻度范围;3.加热,打开蒸汽阀,排尽锅内冷空气,然后关闭排气阀;4.当蒸汽压力上升到1kg/cm2时,稍微打开排气阀使少量蒸汽排出,减少加热,使锅内压力维持在1kg/cm2;5.维持30分钟后,切断加热源,稍微开大排气阀,缓慢排气,待压力降为零时,开锅稍微冷却后取出灭菌物品。第9页,共12页,星期日,2025年,2月5日**

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