第高效液相色谱法.pptVIP

第(Di)高效液相色谱法演示文稿;优选第高效液相(Xiang)色谱法;表(Biao)20-1HPLC法与经典LC法性能对比

经典LCHPLC

固定相一般规格特殊规格

固定相粒度(μm)75～5003～10

粒度分布(RSD)20～30％＜5％

柱长（cm）10～1003～25（分析型）

柱内径（cm）2～50.3～0.46

柱入口压强(MPa)0.001～0.12～40

柱效（理论塔片数/m）10～1003×104～8×104

样品用量(g)1～1010-6～10-4

分析所需时间(h)1～200.05～0.5

装置非仪器化仪器化;二、HPLC与GC差(Cha)别;2．流动相差别

GC：流动相为惰性气体

组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用

HPLC：流动相为液体

流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、

改善(Shan)分离度增加了因素，对分离起很大作用

流动相种类较多，选择余地广

流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用

选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相

可以增大分离选择性;三、高效(Xiao)液相色谱仪流程图;续(Xu)前;第二节基本理(Li)论和条件选择;一、塔板(Ban)理论;二、速率理(Li)论（与GC对比）;2）涡流扩散项(Xiang)A及其影响;图(Tu)示;续(Xu)前;图(Tu)示;降低板高的途径有：

（1）小粒度（dp小）、均匀的球形化学键合相

（A、C小），匀浆法装柱

（2）低粘度流动相（C小），如甲醇(Chun)（乙醇(Chun)与甲醇(Chun)的理

化性质相似却无毒,但25℃时粘度是甲醇的2倍）

（3）流速不宜过快（1ml/min），（Cu小）

（4）增加柱长L，可增加n，但同时也增加tR,

增加分析时间，一般不可取的。

（5）柱温适当，如室温25℃左右

;;第三节各类高效液相色谱(Pu)法;一、液固(Gu)吸附色谱法（LSC）

liquid-solidadsorptionchromatography

流动相为液体，固定相为固体吸附剂;2.影响容量因子k的(De)因素

;续(Xu)前;二、液液分配(Pei)色谱法（LLC）;三、化学键(Jian)合相色谱法（BPC）;（一(Yi)）化学键合相;（二）??相键合(He)相色谱法;续(Xu)前;（三）正相键合(He)相色谱法;续(Xu)前;（四）反相离(Li)子对色谱法（IPC或PIC）;反相离子对色谱(Pu)法模型;（五）反相离子(Zi)抑制色谱;第四(Si)节固定相;第五(Wu)节流动相（溶剂系统）;（一）流(Liu)动相对分离的影响（分离方程式）;（二）流动相的极性和选择性

流动相的极性（强度）

正相色谱：溶剂(Ji)极性越强，洗脱能力越强

反相色谱：极性弱的溶剂洗脱能力强

流动相的选择性

不同种类的溶剂，分子间的作用力不同，故选择性不同

;续(Xu)前;;（四）溶剂系统选择的一(Yi)般原则;一(Yi)、输液系统;;二、色谱柱和进样(Yang)系统;;三、检测器

1、紫外检测器：适于吸收紫外光的(De)物质

;谢谢大家！