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病毒培养技术试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、名词解释（每题3分，共15分）

1.原代细胞培养

2.次代细胞培养

3.连续细胞系

4.蚀斑（空斑）形成

5.TCID50

二、填空题（每空1分，共10分）

1.病毒是一类结构简单的微生物，必须在_________才能复制增殖。

2.常用于病毒培养的哺乳动物细胞，根据其增殖特性可分为_________、_________和_________三种类型。

3.病毒培养最基本的要求是提供合适的_________和_________。

4.在单层细胞培养上观察到的细胞病变效应（CPE）是病毒感染细胞的_________表现。

5.病毒滴度通常用_________表示，其单位是_________。

三、判断题（对的划“√”，错的划“×”，每题2分，共10分）

1.病毒培养只能在活细胞内进行，因此不能用培养基直接培养病毒。（）

2.原代细胞培养可以获得大量同源的细胞，但传代次数有限。（）

3.所有用于病毒培养的细胞系都来源于肿瘤细胞。（）

4.空斑形成法可以直接测定病毒的粒子数。（）

5.TCID50表示能引起50%细胞产生病变的病毒稀释度。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述原代细胞培养和次代细胞培养的主要区别。

2.简述病毒在体外培养过程中对环境条件的主要要求。

3.简述空斑形成法测定病毒滴度的基本步骤。

4.进行病毒培养实验时，需要遵守哪些主要的生物安全操作规程？

五、论述题（10分）

试述病毒培养技术在抗病毒药物筛选中的应用过程和基本原理。

试卷答案

一、名词解释

1.原代细胞培养：从活的组织或器官中直接取出细胞，在体外进行的培养。通常只能传代数次，细胞逐渐衰老死亡。

*解析思路：考察对原代培养定义和特点的理解，强调其来源（直接从组织）和传代能力（有限）。

2.次代细胞培养：由原代细胞首次传代后获得的细胞群体进行的培养。细胞形态和性质相对稳定，传代次数比原代细胞多，但通常仍有限。

*解析思路：考察对次代培养来源（原代细胞首次传代）和特点（相对稳定，传代次数增多但有限）的理解。

3.连续细胞系：从原代或次代细胞中筛选出能在体外无限或接近无限传代、保持稳定遗传和形态特征的细胞群体。

*解析思路：考察对连续细胞系定义的核心特征——无限或接近无限传代和遗传形态稳定性——的理解。

4.蚀斑（空斑）形成：在单层细胞培养物上，被病毒感染并裂解的细胞形成肉眼可见的透明区（蚀斑），周围的未感染细胞仍保持正常形态。

*解析思路：考察对蚀斑形成现象的描述，包括结果（透明区/蚀斑）和前提（单层细胞培养、病毒感染裂解）。

5.TCID50：Titerofplaque-forminginfectiousdosefor50%oftheinoculatedcells，即能引起半数接种细胞产生空斑的病毒稀释度。是衡量病毒毒力或浓度的指标。

*解析思路：考察对TCID50定义（半数空斑形成稀释度）及其含义（病毒浓度/毒力指标）的理解，要求掌握英文缩写及其全称。

二、填空题

1.活细胞内

*解析思路：考察病毒培养的基本前提，即病毒的非细胞特性，必须依赖宿主细胞进行代谢和复制。

2.原代细胞培养、次代细胞培养、连续细胞系

*解析思路：考察对病毒培养常用宿主细胞分类方法的掌握，需要区分三种细胞类型的特点。

3.宿主细胞、营养环境

*解析思路：考察病毒培养所需的基本条件，一个是活的细胞（宿主），另一个是提供生长所需的物质（营养环境）。

4.裂解

*解析思路：考察对CPE本质的理解，病毒感染常导致宿主细胞结构和功能破坏，最终发生裂解，这是形成蚀斑的基础。

5.TCID50、PFU/mL(或plaque-formingunitspermilliliter)

*解析思路：考察病毒滴度的常用表示方法，第一个空填英文缩写，第二个空可以填其国际单位制单位或常用单位。

**(注：如果只要求填英文缩写TCID50也算正确)*

三、判断题

1.√

*解析思路：考察对病毒培养原理的掌握，病毒是寄生性生物，必须在活的易感细胞内才能进行生命活动。

2.√

*解析思路：考察对原代细胞培养特点的理解，由于接触到的环境、细胞分裂次数等因素，原代细胞遗传背景可能不均一，传代次数受限制。

3.×

*解析思路：考察对细胞系来源的