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【2025年】微生物制药技术考试参考(含答案)

一、单项选择题（每题1分，共30分）

1.在青霉素发酵过程中，最先被消耗殆尽的前体物质通常是

A.苯乙酸?B.乳酸?C.柠檬酸?D.乙酸

答案：A

2.下列哪一类基因元件最适合用于构建可诱导型高表达系统？

A.组成型启动子?B.弱化子?C.T7启动子+乳糖操纵子?D.反义RNA

答案：C

3.采用CRISPR-Cas9对产黄青霉进行基因敲除时，提高同源重组效率的关键步骤是

A.增加Cas9蛋白量?B.延长sgRNA长度?C.同步导入双链供体DNA模板?D.降低培养温度

答案：C

4.在动物细胞表达系统中，可显著降低糖基化异质性的培养基添加剂是

A.丙戊酸?B.锰离子?C.2-脱氧葡萄糖?D.氯化钴

答案：C

5.高密度发酵大肠杆菌生产重组蛋白时，最常用且成本最低的碳源补料策略是

A.恒速葡萄糖流加?B.DO-Stat甘油反馈?C.pH-Stat乳糖脉冲?D.指数-衰减混合补料

答案：D

6.下列哪项不是微生物次级代谢产物生物合成后修饰的常见类型？

A.羟基化?B.甲基化?C.糖基化?D.泛素化

答案：D

7.在链霉菌中，多聚酮合成酶(PKS)的“装载模块”主要负责

A.选择起始单元?B.决定还原程度?C.催化硫酯键断裂?D.控制链长

答案：A

8.利用微载体培养Vero细胞时，最适宜的搅拌转速范围是

A.10–20rpm?B.30–60rpm?C.90–120rpm?D.150–200rpm

答案：B

9.在疫苗佐剂开发中，革兰氏阴性菌外膜囊泡(OMV)经基因脱毒后仍保留的主要免疫增强成分是

A.脂质A?B.孔蛋白?C.核心多糖?D.O-抗原

答案：B

10.下列哪一参数最能直接反映发酵罐中菌体代谢活性而非生物量？

A.OUR?B.OD600?C.湿重?D.菌落计数

答案：A

11.在酿酒酵母中敲除HOG1基因后，对高渗胁迫的耐受性将

A.增强?B.减弱?C.不变?D.先增强后减弱

答案：B

12.采用连续离心收获分泌型抗体时，为防止剪切变性，最需优化的变量是

A.离心力×时间乘积?B.温度?C.pH?D.电导率

答案：A

13.下列哪项不是微生物合成紫杉醇前体巴卡亭Ⅲ的关键瓶颈？

A.细胞色素P450氧化步骤?C-13侧链延伸?B.乙酰辅酶A供应?C.氧传递限制?D.产物外排泵缺乏

答案：D

14.在双相发酵体系中，加入油酸甲酯的主要目的是

A.提供电子受体?B.作为萃取剂原位移除产物?C.抑制杂菌?D.增加溶氧

答案：B

15.利用代谢组学筛选高产菌株时，发现TCA循环中间物显著下调，最可能的调控靶点是

A.柠檬酸合酶基因gltA?B.丙酮酸激酶pykF?C.磷酸果糖激酶pfkA?D.乳酸脱氢酶ldhA

答案：A

16.在毕赤酵母表达系统中，甲醇利用慢型(MutS)菌株较Mut+菌株的优势是

A.甲醇耗量低产热少?B.蛋白糖基化更高?C.生长速率快?D.诱导周期短

答案：A

17.下列哪一抗生素的生物合成基因簇最大(100kb)？

A.红霉素?B.万古霉素?C.四环素?D.青霉素

答案：B

18.采用非变性亲和层析纯化带有Strep-tagⅡ的蛋白时，洗脱缓冲液中需加入

A.10mM还原型谷胱甘肽?B.2.5mM脱硫生物素?C.20mMEDTA?D.3M氯化胍

答案：B

19.在微生物合成γ-氨基丁酸(GABA)时，最常用且安全的谷氨酸脱羧酶基因来源是

A.大肠杆菌?B.乳酸菌?C.枯草芽孢杆菌?D.金黄色葡萄球菌

答案：B

20.下列哪一指标最能预测工业规模放大后溶氧受限出现的临界点？

A.kLa值?B.CER?C.qP?D.Yx/s

答案：A

21.在利用CRISPRi下调竞争途径时，dCas9来源通常选择

A.化脓链球菌?B.金黄色葡萄球菌?C.脑膜炎奈瑟菌?D.嗜热菌

答案：A

22.为提高重组蛋白可溶性，常在N端融合的小分子标签是

A.MBP?B.6×His?C.FLAG?D.c-Myc

答案：A

23.在微生物合成阿魏酸时，关键酶肉桂酸-4-羟化酶属于

A.2-酮戊二酸依赖双加氧酶?B.细胞色素P450单加氧酶?C.黄素依赖单加氧酶?D.铜胺氧化酶