无性系变异及突变体的用途1.pptVIP

第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径正常个体之所以会成为突变体，是因为原来的基因结构产生了变化（如果是基因的表达产生了改变，表达量不足或完全不能够表达，则是变异体）。突变能够自发产生，但频率一般比较低。为了提高突变频率，常常通过人为的方式进行人工诱变。人工诱变的方法包括：物理诱变（physicalmutagenesis）和化学诱变(chemicalmutagenesis)生物学诱变(biologicalmutagenesis)三种方式。*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径4.1，物理诱变采用X－ray,γ-ray,UV以及太空辐射等，对生物体进行处理，可以诱导突变的产生。高能电离辐射可造成染色体断裂、易位、倍性改变、点突变等;UV可使DNA形成嘧啶二聚体（pyrimidinedimers），从而造成基因突变。太空育种，复合物理因素的诱变*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径4.2，化学诱变对细胞进行如下种类的化学试剂处理可以诱导突变：碱基类似物具有配对两重性，DNA复制时如掺入碱基类似物可造成碱基配对的错误；碱基修饰剂对碱基某些基团进行化学修饰从而改变碱基的配对性质，造成碱基的转换；DNA嵌合剂可嵌入DNA的碱基对之间，造成复制错误，形成插入突变；*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径4.2，化学诱变常用的化学诱变剂主要是：碱基类似物：5－溴尿嘧啶（BU）；2－氨基嘌呤（AP）碱基修饰剂：亚硝酸（HNO2）；羟胺（HA）；甲基磺酸乙酯（EMS）嵌合剂：吖啶橙；原黄素；吖黄素*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径4.3，生物学诱变这是一类通过分子生物学手段的诱变方法，包括：T-DNAtagging；Transposontagging；SenseorantisenseRNAinactivation；RNAinterference*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径4.3，生物学诱变：T-DNAtagging利用农杆菌Ti质粒上的T-DNA作为mutagen,将其插入植物基因组，造成基因的插入突变。这类突变体还可以作为材料进行如下的研究和应用：突变性状与T-DNA的共分离关系的确定插入点旁侧的基因组序列分析以旁侧序列为探针筛选基因组文库，获取全长基因*GeneAT-DNA基因组文库中含geneA的克隆GeneAGeneAneAGeT-DNA插入突变插入点旁侧序列扩增筛选文库*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径4.3，生物学诱变：Transposontagging将转座成分（transposableelement）导入植物，转座成分的插入可造成基因失活。诱导转座子在转化体内不断转座，以形成一个不断扩大的插入突变群体。这类突变体的应用内容和T-DNAtagging产生的突变体的相同。但这两类诱变方法在产生突变体的数量上有差别。*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径T-DNAtagging与transposontagging的差别T-DNAtagging：一旦整合在基因组的某个位置后，T-DNA就不能再改变自身的位置，所以要想获得更多的突变体就必须大量转化Transposontagging：只要将转座子导入了基因组，转座子就可在转化体内不断发生转座，突变群体会不断扩大，因而无需做大量的转化工作*第二节无性系变异及突变体的用途

4，获得突变体的途径4.3，生物学诱变正义或反义的RNA失活（SenseorantisenseRNAinactivation）导入正义或反义的RNA可引发同源的基因沉默，这种沉默属于转录后水平的基因沉默反义的RNA可与内源的正义RNA互补，形成dsRNA，后者在体内极易被识别为外源RNA而被降解*第一节细胞悬浮培养的方法和特点细胞悬浮培养（cellsuspensionculture）是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖，或者是诱导形态形成（例如胚胎发生）的无菌培养技术。相对于采用固体培养基的培养，液体悬浮培养体系在取得状态比较一致的细胞群体，进行突变个体的筛选、以及进行大规模的培养以生产有重要价值的次生物质（药用物质）方面有重要的应用。*第一节细胞悬浮培养的方法和特点

1，细胞悬浮培养的方法1.1，摇床和三角瓶一般细胞增殖、