1.2微生物的培养技术及应用（课件）高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptxVIP

第1章发酵工程;;第1课时微生物的基本培养技术;从社会中来;一、微生物;1.微生物的概念：微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称，包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。;1.微生物的概念：微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称，包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。;1.微生物的概念：微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称，包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。;（1）防止杂菌污染；

（2）获得纯净的微生物培养物。;二、培养基的配制;1.培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。;（2）固体培养基：呈固体状态的培养基。

①液体培养基中加入琼脂后制成的琼脂固体培养基是实验室最常用的培养基之一。;1.定义：单个或少数同种菌体在固体培养基上大量繁殖，形成肉眼可见的子细胞群体。;3.培养基的营养构成;思考（P10）：为什么培养基需要氮源？;物质;物质;（2）培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。;三、无菌技术;;二、无菌技术;芽孢指某些细菌（如芽孢杆菌等）在一定条件下细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。如某些细菌的芽孢煮沸3小时才死亡。每个细菌仅形成一个芽孢。;消毒和灭菌比较;方法;方法;;超净工作台;方法;湿热灭菌：利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方式。;易错提醒

高压蒸汽灭菌的2个注意点

（1）高压蒸汽灭菌开始之前要将锅内的冷空气排尽。因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。

（2）灭菌完毕后，要待压力降到0时才能打开排气阀。否则会导致锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。;干热灭菌箱;;4.防止杂菌污染的措施;P10旁栏思考：

无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目???？;

;四、微生物的纯培养;1.培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体成为培养物。;酵母菌的纯培养;（二）酵母菌的纯培养;2.目的要求

（1）学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。

（2）学会进行无菌操作。

（3）尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落。;①配制培养基：称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g

琼脂，用蒸馏水定容至1000ml（定容）。;②灭菌：

将配制好的培养基（湿热灭菌）转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。

将5-8套培养皿（干热灭菌）包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h。;;;;（1）培养基灭菌后，需冷却至50℃左右时才能倒平板，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固。

（2）整个操作在酒精灯火焰旁附近进行，避免周围环境中微生物的污染。

（3）平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。;

（4）倒平板时不要将培养基溅在皿盖与皿底之间，否则此培养基不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。

（5）将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。;2.接种和分离酵母菌;（2）平板划线法的具体操作;⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。

⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。

⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。;;;;1.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;;5.第二次及以后的划线时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？;①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物。

②第二次及以后划线前：杀死上次划线时残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端。

③划线结束后：杀死接种环残留菌种，避免污染环境和感染操作者。;（6）划线时，最后一次的划线不要与第一次的划线相连。;思考1：为什么要将平板倒置？;未接种的培养基是不能有菌生长的，如果有菌生长，则说明受到污染或者灭菌不彻底。

正确的做法是，配好培养基之后，将培养基放在温箱里培养