薄层色谱生物自显影：天然单胺氧化酶抑制剂分离的新视角.docxVIP

薄层色谱生物自显影：天然单胺氧化酶抑制剂分离的新视角

一、引言

1.1研究背景与意义

单胺氧化酶（MonoamineOxidase，MAO）作为一种黄素蛋白酶，主要定位于神经元细胞、胶质细胞的线粒体外膜，在脊椎动物的肝和脑中广泛分布。MAO存在A、B两种亚型，二者由不同基因编码，氨基酸序列同源性达70%，但底物特异性和三维结构有所不同。MAO-A对极性芳香胺如5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、去甲肾上腺素（norepinephrine）、多巴胺（dopamine）等具有高亲和力，而MAO-B则对非极性芳香胺如苯乙胺（phenethylamine，PEA）、苄胺（benzylamine）等亲和力更高。在脑内，多巴胺的分解代谢主要依赖MAO-B，MAO-B可将多巴胺分解为3,4-二羟基苯乙酸和高香草酸，并产生小分子H?O?，对神经细胞产生毒性作用；同时，MAO-B还能使刺激多巴胺分泌、抑制多巴胺再摄取的β-苯乙胺脱氨基失去活性，以及将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢嘧啶（l-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine，MPTP）分解为具有神经毒性的1-甲基-4-苯基吡啶离子（l-methyl-4-phenylpyridiniumion，MPP?）。MAO-A主要分布于外周胃肠道、肝脏、肾脏、肺以及脑内的肾上腺素能神经元内，其重要作用之一是平衡大脑中5-羟色胺的分泌，直接影响个体的情绪水平与行为。

研究表明，单胺氧化酶在神经组织中过多会产生过量胺代谢产物，这些产物被视为引发各类精神疾病的重要因素。因此，单胺氧化酶抑制剂在临床治疗中具有关键作用。其中，单胺氧化酶A抑制剂主要用于治疗神经衰弱、抑郁症等疾病，单胺氧化酶B抑制剂则主要用于治疗帕金森病和阿尔茨海默氏症。例如，在帕金森病治疗中，抑制MAO-B的活性可减少多巴胺的降解和再摄取，提高脑内多巴胺浓度，并通过降低H?O?、MPP?等神经毒素水平，延缓黑质细胞的死亡过程，从而改善患者症状。在抑郁症治疗方面，MAO-A抑制剂可阻止脑内5-HT和NE降解，增加脑内突触间隙5-HT和NE的浓度，起到抗抑郁作用。

目前临床上应用的MAO抑制剂种类有限，合成的不可逆抑制剂虽有一定疗效，但常伴有较强副作用，如肼类可能导致肝脏毒性，苯丙胺可能引发心血管疾病，这在很大程度上限制了其临床应用。天然产物因其结构多样性和生物活性多样性，成为寻找新型MAO抑制剂的重要来源。许多天然产物中含有具有MAO抑制活性的成分，如吲哚类、单胺类、黄酮类、β-咔啉类等，且这些天然抑制剂通常具有较低的毒性和副作用，符合人们对“绿色、安全”药物的追求。然而，天然产物成分复杂，如何从众多的天然产物中快速、准确地筛选出具有MAO抑制活性的成分，成为当前天然药物研究面临的一大挑战。

薄层色谱-生物自显影技术（TLC-Bioautography）是一种集分离、鉴定和活性测定于一体的分析技术，它结合了薄层色谱的分离能力和生物自显影的活性检测能力，能够在一次实验中对多种成分进行分离和活性筛选。该技术具有操作简单、实验耗费低、不需要特殊仪器设备等优点，适合一般实验室操作。近年来，薄层色谱-生物自显影技术在天然产物活性成分筛选领域得到了广泛的应用，如在抗菌成分、抗氧化成分、胆碱酶抑制剂等的筛选中都取得了良好的效果。将该技术应用于天然MAO抑制剂的分离筛选，有望快速、高效地发现新型MAO抑制剂，为神经疾病的治疗提供新的药物候选物，具有重要的理论意义和实际应用价值。

1.2国内外研究现状

在天然单胺氧化酶抑制剂的研究方面，国内外学者已取得了一定进展。国外研究中，从多种植物、真菌及微生物中发现了具有MAO抑制活性的成分。例如，从洋甘菊、当归、水薄荷等植物中提取到了吲哚类、黄酮类等具有抑制MAO作用的化合物。在对香豆素类化合物的研究中，发现其抑制活性强弱和选择性大小与香豆素3，4，7位的不同取代基有关，如6-甲基-3(间甲氧基苯)香豆素对单胺氧化酶B的活性较高且选择性是盐酸司立吉林的数倍。

国内研究也在不断探索天然MAO抑制剂的来源和作用机制。有研究从黄连粳稻中获得的原小檗碱类异喹啉生物碱如黄连素、巴马汀和黄连等，均证实有MAO抑制作用，其中黄连对鼠脑部的MAO活性具有强烈的抑制效果。同时，对传统中药的研究中，发现一些中药提取物具有潜在的MAO抑制活性，为开发新