气相色谱分析.pptVIP

续前程序升温好处：改善分离效果缩短分析周期改善峰形提高检测灵敏度第90页，共144页，星期日，2025年，2月5日固定液配比：固定液与担体的质量比。对于表面积大的载体，配比可以大一些，但一般小于30%；对于表面积小的载体，配比小一些，一般小于10%；其次，还要注意分析样品的沸点，对于气体和低沸点样品，配比大些，可采用15%~25%的配比；4）进样时间和进样量进样速度必须快(1s以内)，进样量一般比较少。液体试样0.1~5μL，气体试样0.1~10mL3）固定液的用量第91页，共144页，星期日，2025年，2月5日5）担体的性质和粒度要求担体表面积大，表面和孔径分布均匀；要求担体粒度均匀、细小，但粒度过细会使阻力过大、柱压降增大，对操作不利。3~6mm内径的色谱柱，选择60~80目的单体比较合适。6)气化温度在保证试样不分解的情况下，适当提高气化温度对分离和定量有利，尤其是进样量大时更是如此，一般选择气化温度比柱温高30~70℃。第92页，共144页，星期日，2025年，2月5日在1m长的填充色谱柱上，某镇静药物A及其异构体B的保留时间分别为5.80min和6.60min；峰底宽度分别为0.78min及0.82min，空气通过色谱柱需要1.10min。计算：（1）组分B的分配比；（2）A与B的分离度；（3）该色谱柱的平均有效理论塔板数和塔板高度；（4）A、B两组分完全分离时，所需的柱长。第93页，共144页，星期日，2025年，2月5日解：（1）=5.00=1.00（2）（3）（4）=2.62m第94页，共144页，星期日，2025年，2月5日例：两物质A和B在30cm长的色谱柱上的保留时间分别为16.4和17.63min，有一不与固定相作用的物质，其在此柱上的保留时间为1.30min。物质A和B的峰底宽分别为1.11和1.21min。试问：1）柱分辨率R；2）柱平均理论塔板数nav3）平均塔板高度Hav4）若要求R达到1.5，则柱长至少应为多少？第95页，共144页，星期日，2025年，2月5日1）柱分辨率R第96页，共144页，星期日，2025年，2月5日2）柱平均理论塔板数nav第97页，共144页，星期日，2025年，2月5日3）平均塔板高度Hav第98页，共144页，星期日，2025年，2月5日4）若要求R达到1.5，则柱长至少应为多少？LH有效则有：L1/L2=(R1/R2)230/L2=(1.06/1.5)2L2=60cmα与柱长L无关，根据第99页，共144页，星期日，2025年，2月5日例：已知物质A和B在水和正己烷中的分配系数[K=c(H2O)/c(hex)]分别为6.50和6.31，在一带水硅胶柱中分离，用正己烷为流动相。巳知相比为2.37。试计算（1）两物质的分配比；（2）选择性系数；（3）欲得到分离度为1.5时，需多少块塔板？（4）若柱长为806cm，流动相的流速为7.10cm·s-1，则需多长时间可冲洗出各物质？解：（1）根据K=k·β可知：k=K/β故：kA=6.50/2.37=2.74kB=6.31/2.37=2.66（2）α=tR/(A)/tR/(B)而k=tR//tM所以：α=kA/kB=6.50/6.31=1.030第100页，共144页，星期日，2025年，2月5日tM=L/u=(806/7.10)×(1/60)=1.89mink=(tR-tM)/tM所以kA=2.74=(tRA-1.89)/1.89故tRA=7.07min同理：tRB=6.92min（3）欲得到分离度为1.5时，需多少块塔板？n=16R2(α/α-1)2[(1+k)/k]2=16×(1.5)2×(1.030/0.030)2×[3.66/2.66]2=78354（4）若柱长为806cm，流动相的流速为7.10cm·s-1，则需多长时间可冲洗出各物质？第101页，共144页，星期日，2025年，2月5日（2）有效塔板数n有效：在以上计算理论塔板数的式子中使用的是保留时间，它包括了死时间，它与组分在柱内的分配无关，因此不能真正反映色谱柱的柱效。为此，引入了有效塔板数的概念。第58页，共144页，星期日，2025年，2月5日同理有效塔板高度为：第59页，共144页，星期日，2025年，2月5日（3）塔板理论