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猪瘟活疫苗（兔源）组织毒生产工艺优化与贮存方法的深度剖析

一、引言

1.1研究背景

猪瘟（ClassicalSwineFever，CSF）是由猪瘟病毒（ClassicalSwineFeverVirus，CSFV）引起的猪的一种高度接触性、致死性传染病，严重危害全球养猪业。猪瘟具有很强的传染性和高致死率，不同年龄、性别和品种的猪均能感染，一旦爆发，可导致大量猪只死亡，给养猪业带来巨大的经济损失。在我国，养猪业是农业的重要组成部分，猪肉在居民肉类消费中占比高达62%，养猪产值达1.6万亿，带动相关产业产值3万多亿。因此，猪瘟的爆发不仅影响养猪业的经济效益，还对国计民生产生重要影响。

自1956年我国推广猪瘟兔化弱毒疫苗以来，猪瘟的防控取得了显著成效。猪瘟活疫苗（兔源），简称猪瘟脾淋苗，因其免疫原性强、免疫效果好、过敏率低、免疫后能快速产生免疫力等优点，深受广大养殖户的喜爱，在猪瘟的防控中发挥着重要作用。然而，猪瘟脾淋苗的组织毒生产工艺存在诸多问题，如生产工艺繁琐，整个过程需要测定温度21次，人员工作量大，劳动强度高；含毒组织收获量有限，主要依赖家兔的脾脏和肠系膜淋巴结，限制了疫苗的产量；组织毒保存时间短，对保存条件要求苛刻，增加了生产成本和生产安排的难度。这些问题制约了猪瘟脾淋苗的大规模生产和应用，难以满足日益增长的市场需求。

随着养猪业的规模化、集约化发展，对猪瘟疫苗的需求不断增加，对疫苗质量和产量的要求也越来越高。因此，优化猪瘟活疫苗（兔源）组织毒生产工艺，提高组织毒产量和保存期限，降低生产成本，对于提高疫苗质量、保障养猪业的健康发展具有重要的现实意义。

1.2国内外研究现状

国内外学者针对猪瘟活疫苗（兔源）组织毒生产和贮存方法开展了一系列研究。在生产工艺方面，研究主要集中在优化接种和收毒环节，以提高病毒产量和质量。例如，有研究通过调整接种剂量和接种途径，探索最佳的接种方案，发现适当提高接种剂量可增加病毒的感染效率，但过高的剂量可能导致家兔不良反应增加。在收毒部位的选择上，除了传统的脾脏和肠系膜淋巴结，也有研究尝试从其他组织中收获病毒，如肝脏、颌下淋巴结等，但结果表明肝脏含毒量较低，颌下淋巴结收获困难且易污染，均不能达到生产要求。

在贮存方法研究方面，重点关注保护剂的筛选和保存温度的优化。目前常用的保护剂包括生理盐水、Hank′s液、5%蔗糖脱脂牛奶和猪瘟耐热保护剂等。研究表明，不同保护剂对组织毒的保存效果存在差异，生理盐水和Hank’s液保存的组织，只有在-70℃时能够维持组织病毒含量到150日以上；-15℃保存组织，生理盐水保存的组织病毒含量会迅速降低，Hank’s保存的组织病毒含量可以维持到60日。猪瘟耐热保护剂和5%蔗糖脱脂牛奶保存的组织病毒在冷冻保存下，保存时间能够到达150d以上；2℃～8℃冷藏保存，5%蔗糖脱脂牛奶保存的组织在第7日时病毒含量就已经不符合配苗要求了，猪瘟耐热保护剂保存的组织可以维持到120d以上。

尽管已有这些研究成果，但当前仍存在一些不足和空白。在生产工艺上，虽然对部分环节进行了优化，但整体工艺仍较为繁琐，劳动强度大的问题未得到根本解决。在贮存方法方面，虽然筛选出了一些有效的保护剂，但对于保护剂的作用机制以及不同保护剂在不同保存条件下的长期稳定性研究还不够深入。此外，针对不同地区的气候条件和生产实际，如何选择最适宜的贮存方法也缺乏系统的研究。

1.3研究目的与意义

本研究旨在通过对猪瘟活疫苗（兔源）组织毒生产工艺的深入研究，优化生产流程，降低生产成本，提高疫苗产量和质量。具体来说，从减少测温次数、增加含毒组织收获量两个方面与原生产方法进行对比试验，探索更高效、简便的生产方法。同时，研究组织毒的保存方法，筛选最佳的保护剂和保存温度，延长组织毒保存时间，为疫苗的生产和应用提供更可靠的保障。

本研究的意义在于：一是提高疫苗质量，优化生产工艺和贮存方法可以确保疫苗中病毒含量的稳定性和有效性，从而提高疫苗的免疫效果，更好地防控猪瘟。二是降低生产成本，通过简化生产流程、提高组织毒产量和延长保存时间，可以减少人力、物力和财力的投入，降低疫苗的生产成本，提高企业的经济效益。三是推动养猪业健康发展，优质、低成本的猪瘟疫苗能够满足养猪业的需求，有效预防猪瘟的发生和传播，保障养猪业的稳定发展，促进农业经济的繁荣，对保障国家食品安全和社会稳定也具有重要意义。

二、猪瘟活疫苗（兔源）组织毒生产方法研究

2.1猪瘟活疫苗（兔源）概述

猪瘟活疫苗（兔源），即猪瘟脾淋苗，是预防猪瘟的重要生物制品。其主要特点是免疫原性强，能激发猪体产生强烈的免疫反应，从而提供有效的免疫保护。免疫效果好，可使猪在接种后短时间内获得免疫力，有效抵御猪瘟