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2025年智慧树知到《高级分子克隆技术》考试题库及答案解析

就读院校：________姓名：________考场号：________考生号：________

一、选择题

1.在分子克隆过程中，用于连接目的基因和载体质粒的酶是（）

A.聚合酶

B.连接酶

C.解旋酶

D.限制性内切酶

答案：B

解析：连接酶是分子克隆中用于连接目的基因和载体质粒的关键酶，它能够催化DNA片段之间的磷酸二酯键形成。聚合酶主要用于DNA复制，解旋酶用于解开DNA双螺旋结构，限制性内切酶用于切割DNA。

2.下列哪种载体不适合用于表达较大分子量的蛋白质（）

A.质粒载体

B.噬菌体载体

C.病毒载体

D.YAC载体

答案：A

解析：质粒载体通常容量有限，一般只能承载几kb到几十kb的外源DNA，不适合表达较大分子量的蛋白质。噬菌体载体、病毒载体和YAC载体（酵母人工染色体载体）均具有较大的容量，适合表达较大分子量的蛋白质。

3.在进行基因测序时，常用的测序方法是（）

A.Sanger测序法

B.Maxam-Gilbert测序法

C.基因芯片法

D.PCR扩增法

答案：A

解析：Sanger测序法是目前最常用的一种DNA测序方法，基于链终止子的原理，通过PCR扩增目的DNA片段，然后加入不同碱基的链终止子，通过电泳分离得到DNA序列信息。Maxam-Gilbert测序法是早期的测序方法，现已较少使用。基因芯片法和PCR扩增法与测序原理无关。

4.下列哪种物质是DNA合成的原料（）

A.RNA聚合酶

B.脱氧核苷三磷酸

C.核糖核苷酸

D.DNA连接酶

答案：B

解析：DNA合成是指以DNA为模板合成新的DNA链的过程，其原料是脱氧核苷三磷酸（dATP、dGTP、dCTP、dTTP），而不是核糖核苷酸（RNA合成原料）。RNA聚合酶是RNA合成的催化剂，DNA连接酶是连接DNA片段的酶。

5.在基因工程中，用于扩增目的基因的常用技术是（）

A.基因重组

B.基因测序

C.PCR扩增

D.基因芯片

答案：C

解析：PCR（聚合酶链式反应）是一种在体外快速扩增特定DNA片段的技术，是基因工程中用于扩增目的基因的常用方法。基因重组是将外源基因导入受体细胞的过程。基因测序是测定DNA序列的方法。基因芯片是用于检测基因表达或基因突变的分析技术。

6.下列哪种酶用于切割DNA分子，产生黏性末端（）

A.聚合酶

B.连接酶

C.解旋酶

D.限制性内切酶

答案：D

解析：限制性内切酶是一类能够识别并切割DNA特定位点的核酸酶，可以产生黏性末端或平末端。聚合酶用于DNA复制，连接酶用于连接DNA片段，解旋酶用于解开DNA双螺旋。

7.在构建表达载体时，通常需要引入（）

A.启动子

B.终止子

C.标记基因

D.以上都是

答案：D

解析：构建表达载体时，通常需要引入启动子（控制基因转录的调控序列）、终止子（终止基因转录的调控序列）和标记基因（用于筛选转化成功的细胞）。这些元件对于基因的表达和载体在宿主细胞中的稳定维持都是必需的。

8.下列哪种方法是用于分离纯化目的蛋白的（）

A.凝胶过滤层析

B.离子交换层析

C.亲和层析

D.以上都是

答案：D

解析：凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析都是常用的蛋白质分离纯化方法。凝胶过滤层析根据分子大小分离蛋白质，离子交换层析根据蛋白质电荷分离蛋白质，亲和层析利用蛋白质与配体的特异性结合进行分离。

9.在进行基因突变分析时，常用的方法是（）

A.基因测序

B.基因芯片

C.DNA杂交

D.PCR扩增

答案：A

解析：基因测序是测定DNA序列的方法，可以用于检测基因突变。基因芯片是用于检测基因表达或基因突变的分析技术，但通常不用于检测单个碱基的突变。DNA杂交是利用核酸碱基互补配对原理的技术，可用于检测特定DNA片段的存在。PCR扩增是扩增DNA片段的技术，可用于制备测序模板或进行基因突变分析，但不是直接检测突变的方法。

10.下列哪种载体常用于构建基因库（）

A.质粒载体

B.噬菌体载体

C.YAC载体

D.病毒载体

答案：C

解析：YAC（酵母人工染色体）载体具有较大的容量，可以承载数百kb到几千kb的外源DNA，适合构建基因库。质粒载体容量有限，噬菌体载体容量较大但通常用于表达较小分子量的蛋白质，病毒载体容量较大但安全性问题较多。

11.在构建表达载体时，启动子的作用是（）

A.提供复制起始点

B.引导转录终止

C.控制基因转录

D.提供翻译起始密码子

答案：C

解析：启动子是位于基因上游的调控序列，是RNA聚合酶结合并启动转录的位点，它控制着基因的转录效率。

12.下列哪种酶在PCR反应中起关键作