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演讲人:
日期:
肾脏疾病病理诊断流程
CATALOGUE
目录
01
标本接收与处理
02
制片与染色技术
03
初步病理诊断
04
辅助诊断技术应用
05
报告生成与审核
06
质量监控与归档
01
标本接收与处理
标本登记与信息核对
双人核对机制
异常情况处理
电子化录入系统
由两名专业人员同步核对送检单与标本容器标签信息,确保患者姓名、病历号、标本类型及部位完全一致,避免混淆或遗漏关键临床数据。
采用条码扫描或RFID技术将标本信息录入病理信息系统,自动生成唯一标识码,实现全流程可追溯管理,减少人工录入错误风险。
对信息不全、标签模糊或标本量不足的情况,需立即联系临床科室补全资料,并记录在案,确保后续诊断环节的合规性。
标准化固定液选择
固定时间严格控制在6-48小时内,环境温度维持在20-25℃,避免过度固定导致抗原丢失或固定不足影响切片质量。
时间与温度控制
特殊标本处理
对穿刺活检等微小标本需优先处理,采用专用滤膜包埋防止丢失,并标注切片方向以保留组织结构完整性。
根据肾脏组织特性(如肾小球、肾小管或肿瘤组织)选用10%中性缓冲福尔马林,固定液体积需达到标本体积的10倍以上,确保渗透均匀性。
组织固定与预处理规范
取材分选标准流程
分层取样原则
对肾脏肿瘤标本需按包膜、肿瘤主体及邻近正常组织分层取材,确保全面评估肿瘤浸润深度及边界状态,每块组织厚度不超过3mm。
标记与定位要求
每批次取材后需由资深技术员复核组织块数量、大小及标记准确性,并留存影像记录备查,确保后续制片和诊断的可靠性。
使用不同颜色染料或定向标记物区分标本切面,并在记录单中绘制示意图,辅助病理医师定位病变区域与正常组织关系。
质量控制节点
02
制片与染色技术
石蜡切片制备标准
组织固定与脱水
采用10%中性缓冲福尔马林固定24小时以上,确保组织形态完整;梯度乙醇脱水(70%-100%)结合二甲苯透明,避免组织收缩或硬化。
02
04
03
01
切片厚度控制
调整切片机至2-4μm厚度,避免过厚导致染色模糊或过薄引起组织撕裂,需定期校准切片刀角度。
浸蜡与包埋
使用熔点为56-58℃的石蜡浸渍3小时,包埋时保持组织方向一致,确保切片连续性及后续染色定位准确性。
防脱片处理
载玻片需预先涂覆多聚赖氨酸或APES胶,60℃烘烤1小时增强附着力,减少染色过程中组织脱落风险。
0.5%伊红Y溶液染色30秒至1分钟,梯度乙醇脱水后透明,使胞质和胶原纤维呈现均匀粉红色。
伊红复染
严格掌握分化时间(通常1-3秒),避免核染色过浅;脱水乙醇浓度需逐级升高(85%-100%),防止组织收缩变形。
分色与脱水控制
01
02
03
04
使用Harris或Mayer苏木精液染色5-8分钟,盐酸乙醇分化后流水返蓝,确保细胞核呈清晰蓝色且对比度适中。
苏木精染色
中性树胶封片后镜检,要求细胞核与胞质分界清晰,无染色沉淀或气泡,背景干净无残留染料。
封片与质检
常规染色(HE)操作规范
特殊染色技术应用
PAS染色(糖原与基底膜)
过碘酸氧化后Schiff试剂反应10分钟,显红色糖原或基底膜,用于糖尿病肾病或膜性肾病诊断。
丽春红-苯胺蓝染色区分肌纤维(红色)与胶原(蓝色),评估肾间质纤维化程度。
染色后偏振光下观察苹果绿双折光,确诊肾淀粉样变性,需控制染色pH至9-10避免假阴性。
直接法标记IgG、IgA等免疫球蛋白,冷冻切片需-20℃保存,荧光显微镜下观察颗粒状沉积模式。
Masson三色(胶原纤维)
刚果红(淀粉样变)
免疫荧光技术
03
初步病理诊断
镜下组织结构评估
肾小球结构观察
重点评估肾小球毛细血管袢的形态、基底膜厚度及系膜区增生程度,识别是否存在节段性或全球性硬化、新月体形成等特征性病变。
肾小管间质分析
检查肾小管上皮细胞是否萎缩、变性或坏死,间质区域有无纤维化、炎性细胞浸润或水肿,以判断病变累及范围及严重性。
血管系统评估
观察肾内小动脉和细动脉的管壁厚度、内膜增生及透明变性情况,明确是否存在高血压或血管炎相关损伤。
肾小球细胞增生类型鉴别
区分系膜细胞、内皮细胞或上皮细胞增生,结合免疫组化标记辅助判断增生细胞的来源及性质。
细胞异型性评估
通过高倍镜观察细胞核大小、染色质分布及核仁形态,鉴别肿瘤性病变(如肾细胞癌)与非肿瘤性病变(如炎症或代谢性疾病)。
特殊包涵体检测
识别细胞内或间质中是否存在病毒包涵体、结晶沉积(如尿酸或胱氨酸)或脂质空泡,为病因诊断提供线索。
细胞形态学特征分析
病变分级分期判定
根据国际标准(如ISN/RPS分类)对肾小球肾炎进行分级,量化系膜增生、毛细血管袢坏死或新月体形成的比例。
肾小球病变分级
肾小管间质损伤分期
血管病变严重度分层
依据间质纤维化范围和肾小管萎缩程度划分早期(<25%)、中期(25%-50%)及
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