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肾脏疾病病理诊断流程

CATALOGUE

目录

01

标本接收与处理

02

制片与染色技术

03

初步病理诊断

04

辅助诊断技术应用

05

报告生成与审核

06

质量监控与归档

01

标本接收与处理

标本登记与信息核对

双人核对机制

异常情况处理

电子化录入系统

由两名专业人员同步核对送检单与标本容器标签信息,确保患者姓名、病历号、标本类型及部位完全一致,避免混淆或遗漏关键临床数据。

采用条码扫描或RFID技术将标本信息录入病理信息系统,自动生成唯一标识码,实现全流程可追溯管理,减少人工录入错误风险。

对信息不全、标签模糊或标本量不足的情况,需立即联系临床科室补全资料,并记录在案,确保后续诊断环节的合规性。

标准化固定液选择

固定时间严格控制在6-48小时内,环境温度维持在20-25℃,避免过度固定导致抗原丢失或固定不足影响切片质量。

时间与温度控制

特殊标本处理

对穿刺活检等微小标本需优先处理,采用专用滤膜包埋防止丢失,并标注切片方向以保留组织结构完整性。

根据肾脏组织特性(如肾小球、肾小管或肿瘤组织)选用10%中性缓冲福尔马林,固定液体积需达到标本体积的10倍以上,确保渗透均匀性。

组织固定与预处理规范

取材分选标准流程

分层取样原则

对肾脏肿瘤标本需按包膜、肿瘤主体及邻近正常组织分层取材,确保全面评估肿瘤浸润深度及边界状态,每块组织厚度不超过3mm。

标记与定位要求

每批次取材后需由资深技术员复核组织块数量、大小及标记准确性,并留存影像记录备查,确保后续制片和诊断的可靠性。

使用不同颜色染料或定向标记物区分标本切面,并在记录单中绘制示意图,辅助病理医师定位病变区域与正常组织关系。

质量控制节点

02

制片与染色技术

石蜡切片制备标准

组织固定与脱水

采用10%中性缓冲福尔马林固定24小时以上,确保组织形态完整;梯度乙醇脱水(70%-100%)结合二甲苯透明,避免组织收缩或硬化。

02

04

03

01

切片厚度控制

调整切片机至2-4μm厚度,避免过厚导致染色模糊或过薄引起组织撕裂,需定期校准切片刀角度。

浸蜡与包埋

使用熔点为56-58℃的石蜡浸渍3小时,包埋时保持组织方向一致,确保切片连续性及后续染色定位准确性。

防脱片处理

载玻片需预先涂覆多聚赖氨酸或APES胶,60℃烘烤1小时增强附着力,减少染色过程中组织脱落风险。

0.5%伊红Y溶液染色30秒至1分钟,梯度乙醇脱水后透明,使胞质和胶原纤维呈现均匀粉红色。

伊红复染

严格掌握分化时间(通常1-3秒),避免核染色过浅;脱水乙醇浓度需逐级升高(85%-100%),防止组织收缩变形。

分色与脱水控制

01

02

03

04

使用Harris或Mayer苏木精液染色5-8分钟,盐酸乙醇分化后流水返蓝,确保细胞核呈清晰蓝色且对比度适中。

苏木精染色

中性树胶封片后镜检,要求细胞核与胞质分界清晰,无染色沉淀或气泡,背景干净无残留染料。

封片与质检

常规染色(HE)操作规范

特殊染色技术应用

PAS染色(糖原与基底膜)

过碘酸氧化后Schiff试剂反应10分钟,显红色糖原或基底膜,用于糖尿病肾病或膜性肾病诊断。

丽春红-苯胺蓝染色区分肌纤维(红色)与胶原(蓝色),评估肾间质纤维化程度。

染色后偏振光下观察苹果绿双折光,确诊肾淀粉样变性,需控制染色pH至9-10避免假阴性。

直接法标记IgG、IgA等免疫球蛋白,冷冻切片需-20℃保存,荧光显微镜下观察颗粒状沉积模式。

Masson三色(胶原纤维)

刚果红(淀粉样变)

免疫荧光技术

03

初步病理诊断

镜下组织结构评估

肾小球结构观察

重点评估肾小球毛细血管袢的形态、基底膜厚度及系膜区增生程度,识别是否存在节段性或全球性硬化、新月体形成等特征性病变。

肾小管间质分析

检查肾小管上皮细胞是否萎缩、变性或坏死,间质区域有无纤维化、炎性细胞浸润或水肿,以判断病变累及范围及严重性。

血管系统评估

观察肾内小动脉和细动脉的管壁厚度、内膜增生及透明变性情况,明确是否存在高血压或血管炎相关损伤。

肾小球细胞增生类型鉴别

区分系膜细胞、内皮细胞或上皮细胞增生,结合免疫组化标记辅助判断增生细胞的来源及性质。

细胞异型性评估

通过高倍镜观察细胞核大小、染色质分布及核仁形态,鉴别肿瘤性病变(如肾细胞癌)与非肿瘤性病变(如炎症或代谢性疾病)。

特殊包涵体检测

识别细胞内或间质中是否存在病毒包涵体、结晶沉积(如尿酸或胱氨酸)或脂质空泡,为病因诊断提供线索。

细胞形态学特征分析

病变分级分期判定

根据国际标准(如ISN/RPS分类)对肾小球肾炎进行分级,量化系膜增生、毛细血管袢坏死或新月体形成的比例。

肾小球病变分级

肾小管间质损伤分期

血管病变严重度分层

依据间质纤维化范围和肾小管萎缩程度划分早期(<25%)、中期(25%-50%)及

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